咖啡因对溃疡性结肠炎艾灸抗炎作用的影响

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目的:在建立溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)模型的基础上,观察艾灸对UC的治疗效应,以及咖啡因摄入对艾灸疗效的影响。方法:选取清洁级雄性昆明种小鼠,体重32±2g,随机分为空白组、模型组、模灸组、咖啡因组、咖啡因+灸组。咖啡因组又分为(1)无咖啡因组(不含咖啡因的咖啡)(2)低浓度组(10mg/kg/day caffeine)(3)中浓度组(30mg/kg/day caffeine)(4)高浓度组(50mg/kg/day caffeine);咖啡因+灸组又分为(1)无咖啡因+灸组(2)低浓度+灸组(3)中浓度+灸组(4)高浓度+灸组。采用3%的葡聚糖硫酸钠(Dextran Sulfate Sodium,DSS),自由饮用7天建立UC模型。模灸组选取“关元”穴温和施灸5天,每次15min;咖啡因组根据小鼠当日体重给予相应剂量咖啡因灌胃;咖啡因+灸组于当日咖啡因灌胃后再进行温和灸15min;所有受试组均给予相同方式捆绑。评价小鼠疾病活动指数(Disease Activity Index,DAI);截取远端结肠固定保存、HE染色,光镜下观察结肠组织结构。统计分析:体重数据采用重复测量方差分析,DAI评分采用单因素方差分析,以P<0.05为差异具有统计学意义。结果:1、艾灸对UC小鼠疗效评价:(1)小鼠DAI评分显示:与空白组相比较,模型组DAI评分明显增高;与模型组小鼠比较,模灸组小鼠DAI评分降低(P<0.001)。(2)HE切片结果显示:与空白组相比,模型组结肠粘膜水肿、不连续,腺泡排列紊乱,可见溃疡面,炎性细胞浸润;模灸组少见粘膜充血或水肿,部分腺体破坏,少量炎性细胞浸润,病理表现接近空白组。2、咖啡因灌胃对小鼠UC的干预作用:(1)DAI评分显示:无咖啡因组DAI评分与模型组差异无统计学意义(>0.05);咖啡因(10,30,50mg/kg/day)治疗后,DAI评分降低(P<0.001);三种咖啡因灌胃剂量间DAI评分差异无统计学意义(P>0.05)。(2)HE切片结果显示:低浓度组粘膜水肿程度较模型组减轻,偶见溃疡面,少量腺体破坏,伴轻度炎性细胞浸润;中浓度、高浓度组粘膜下层少见充血或水肿,腺体排列较整齐,少量炎性细胞浸润。3、咖啡因对艾灸治疗UC小鼠效应影响:(1)DAI评分显示:无咖啡因+灸组DAI评分与模灸组相比无显著统计学差异(P>0.05);低浓度+灸组、中浓度+灸组DAI评分与模灸组差异无统计学意义(P>0.05);高浓度+灸组与模灸组相比DAI评分明显升高(P<0.05)。(2)光镜下结果显示:低浓度+灸组、中浓度+灸组少见粘膜水肿,少量腺体破坏,少量炎性细胞浸润;高浓度+灸组中浓度、高浓度因组粘膜下层少见充血或水肿,腺体排列较整齐,少量炎性细胞浸润。结论:1、艾灸对UC有治疗作用;2、咖啡因摄入对UC有治疗作用,且该作用与摄入剂量无关;3、50mg/kg/day咖啡因摄入可抑制艾灸对UC抗炎作用,而10,30mg/kg/day的咖啡因对艾灸的UC疗效并不影响。
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