论文部分内容阅读
目的:研究Toll样受体-4(TLR-4)和内源性配体人类β防御素-2(HBD-2)及γ-干扰素(IFN-γ)在HBV宫内感染中的作用。方法:选取入院后外周血乙肝标志物(HBVM)检测HBsAg、HBeAg均为阳性,肝功能正常的孕妇,分娩前测其外周血HBV-DNA含量,共57例,在知情同意的情况下,于分娩后取3毫升脐血做血清HBVM检查,根据结果,脐血清HBsAg、HBeAg任一项阳性者为宫内感染组,阴性者为宫内未感染组。选择同期分娩的乙肝两对半正常的健康孕妇20例为对照组, 77例孕妇于分娩前留取3毫升外周血用于IFN-γ的测定,分娩后无菌收集胎盘,经处理后,15分钟内置于液氮罐中速冻,保存于-80℃冰箱中备用。采用定性PCR检测胎盘组织的HBV-DNA,并用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR的方法检测TLR-4,HBD-2在各组孕妇胎盘组织中的表达,选择GAPDH为内参,采用2-△△Ct法计算相对表达量。结果:(1)孕母血清HBsAg、HBeAg阳性的宫内感染率为45.6%,(2)HBVDNA≥1×10~5与HBVDNA<1×10~5进行宫内感染率的比较,χ~2=29.317,差异有统计学意义(p<0.01)。(3)胎盘感染率为63.16%。(4)宫内感染组IFN-γ在孕妇外周血的水平低于HBV宫内未感染组和对照组,差异有统计学意义(p<0.01),宫内未感染组和对照组比较,差异无统计学意义(p>0.05)。宫内感染组TLR-4表达低于HBV宫内未感染组和对照组,差异有统计学意义(p<0.01)。宫内未感染组和对照组比较,差异无统计学意义(p>0.05)。宫内感染组HBD-2表达低于HBV宫内未感染组和对照组,差别有统计学意义(p<0.01),宫内未感染组和对照组比较,差异无统计学意义(p>0.05)。(5)胎盘TLR-4与孕妇外周血IFN-γ水平成正相关关系(r=0.815,p<0.01)。胎盘HBD-2亦与孕妇外周血IFN-γ水平成正相关关系(r=0.685,p<0.01)。TLR-4与HBD-2的表达成正相关关系(r=0.896,p<0.01)。结论:(1)血清HBsAg、HBeAg阳性且HBV-DNA≥1×10~5copies/ml的孕母容易将病毒传播给胎儿。(2)胎盘感染是乙肝病毒宫内感染的一个途径。(3)乙肝病毒宫内感染组的胎盘TLR-4、HBD-2及孕妇外周血IFN-γ的表达下降导致机体抵御病毒的功能减弱。(4)孕母IFN-γ水平与TLR-4、HBD-2表达呈正相关,胎盘组织中TLR-4与HBD-2的表达也呈正相关,三者水平下降可能在整个级联信号途径中共同导致乙肝病毒宫内感染发生。