棉花纤维特异表达基因LTP3和FbL2A启动子的克隆及其活性研究

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:beryl1830
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
棉纤维是由胚珠外珠被表皮细胞经分化突起、伸长和次生壁加厚而形成的,这些形成纤维的细胞受激素的诱导,从开花当天开始伸长,持续约50天后发育成熟。在纤维发育的不同时期中,有许多基因的表达呈现明显的组织特异性和发育的阶段性。虽然有些基因的确切功能还不太清楚,但根据这些基因表达的特征,弄清了不少在纤维发育的不同阶段特异表达的启动子,为利用基因工程的方法定向改良棉花纤维品质提供了很好的启动子元件。如在纤维发育早期特异表达的E6基因启动子,LTP基因启动子,在纤维发育中后期特异表达的FbL2A基因启动子等。 以彩棉的基因组为模板,利用PCR的方法,克隆了LTP3及FbL2A两个基因的启动子,大小分别为1548bp和4050bp,还将LTP3启动子5’端缺失约900bp,得到614bp的LTP3启动子片段。分别命名为LTP3(1)、LTP3(2)及FbL2A。经测序分析,与GenBank中登录的启动子序列同源性均为99%,仅有个别碱基发生改变,而启动子的基本元件未发生突变。 将克隆的启动子分别与报告基因GUS融合,构建植物表达载体pBI-LTP3(1)、pBI-LTP3(2)及p23G-FbL2A。分别将pBI-LTP3(1)、pBI-LTP3(2)两个质粒转化烟草,研究启动子的启动活性,同时以pBI121质粒为对照。对再生苗进行PCR检测,共得到阳性植株33棵,其中转pBI-LTP3(1)的植株11棵,转pBI-LTP3(2)的植株14棵,另外还有转pBI121的植株8棵。对PCR阳性植株进行Southern分析表明外源的LTP3启动子及GUS基因已经整合到烟草的基因组中。 取转基因阳性苗新生的叶片,对GUS进行组化分析表明,转pBI121质粒的烟草,在叶脉及叶肉细胞中均有GUS基因表达,而转pBI-LTP3(1)和pBI-LTP3(2)质粒的烟草中,仅在叶片表皮毛中有GUS基因表达。结果表明,LTP3启动子的表达具有组织特异性,且LTP3基因上游614bp已经包含了启动子活性所必须的所有元件。 另外,还采用花粉管通道法将pBI121、pBI-LTP3(1)和pBI-LTP3(2)质粒转化棉花,摸索了棉花的转化方法。
其他文献
地图显示效率一直是嵌入式GIS系统的核心问题.一方面,嵌入式系统处理器性能低、内存容量小;另一方面,GIS数据量大、计算复杂.针对这一对突出的矛盾,本文提出了一种新的GIS数据组织模型与存取机制,在I/O阶段,从逻辑和物理2个层面最大限度地减少对冗余数据的读取和处理,保障地图的快速显示.
随当下信息时代的发展,景观设计不再是一个独立的事件,人们日益增长的精神需求和科技的发展要求其不仅要满足视觉审美的需求,更是要满足"五感"的互动体验。智能交互性动态景
以H2SO4溶液酸解脱脂棉的方法制备亚微级纤维素纤维(SCF),研究了其对水泥浆体微观结构的影响.结果表明:原始脱脂棉在酸解作用下,微原纤逐步剥离,形成尺度细小的亚微级纤维素
为研究泡沫混凝土内部的扩散特性,利用电化学法,对比分析了泡沫混凝土与普通混凝土在不同水温、有无发泡剂以及不同浸水时间等条件下的交流阻抗图谱.结果表明:与普通混凝土相
利用微生物的酶化作用诱导矿物沉积来封堵混凝土裂缝是防渗堵漏的有效途径.采用裂缝内直接灌浆(浆液为菌液、营养盐和钙源溶液的混合溶液)和裂缝内预填介质再灌浆2种封堵处理
本次授课内容为译林版《牛津高中英语》模块.5.Unit.1的Word.power.板块,是一堂英语词汇教学课。作者依据"学讲方式"新课改理念的指导,以学生自主学习为主导方式,以合作学习
本文旨在比较研究两种养殖模式下大口黑鲈肌肉的品质差异,以期为池塘工业化养殖模式的改进与推广提供有价值的理论指导。选取2月龄幼鱼(体长约5cm)随机分为静水养殖组和流水
"后进生",他们或调皮捣蛋不思进取,或自暴自弃不喜学习……无论哪一种类型,都会拖班级后腿,让老师们头痛不已。作家冯骥才在《珍珠鸟》一文中这样说:"信赖,可以创造出美好的境界