024放线菌及其所产抗生素的初步研究

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本文针对防治小麦纹枯病的上百种生防放线菌进行筛选后,选择出目标菌株024,随后对它的菌种的初步鉴定、初始发酵条件与最适发酵条件进行了探索,并对024放线菌所产抗生素的纯化、理化性质、发酵液的防治效果等内容进行了研究。 对024放线菌进行初步鉴定后认为,该菌是小链孢菌属(Microstreptospora)的一个新种或变种。抑菌谱测定表明024放线菌的发酵液对多种真菌如:苹果炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)、小麦赤霉病菌(Fusarium gramiaearum)、小麦长孺孢(Helminthosporium sativum)、泡桐溃疡病菌(Botryosphaeria dothidea)、番茄早疫病菌(Alternaria solani)、板栗疫病菌(Endothia parasitica)等有良好的抑制效果。 研究表明,摇床发酵初始培养基组成为:黄豆饼10g/L,葡萄糖10g/L,蛋白胨3g/L,NaCl 2.5g/L,CaCO3,2g/L,初始pH值7`0;发酵条件为:装液量100ml/500ml,转速110r/min,温度28℃,培养时间10d;改良后的最适培养基成分为:黄豆饼10g/L,葡萄糖10g/L,蛋白胨3g/L,NaGl 2.5g/L,CaCO3 2g/L,MgSO4 5mmol/L,KH2PO4 5mmol/L,FeCl3 1mmol/L,初始pH值7.0;发酵液培养条件为:装液量50ml/250ml,转速170r/min,温度28℃—39℃(24h变温),培养时间2d。改良后的发酵液产生的抗生素的抑菌能力提高到79.2%,较原来有较大提高。初始培养基颜色为红褐色,改良后的培养基颜色为淡黄色,且改良后发酵液过滤速度快,蛋白含量和色素含量少。对发酵液透析、超滤、金属离子沉淀、加热等处理研究后结论如下:024放线菌发酵液中的抗生物质为非蛋白质类,分子量较大,具有较强的热稳定性;出苗试验与防效对比试验表明024 放线菌发酵液在低浓度与原液浓度条件下能提高小麦种子发芽率,促进 苗的生长,并对小麦纹枯病有着良好的防治效果,但高浓度下使出苗率 与防效都降低。 024放线菌发酵物质-抗生素纯化研究结果表明,通过冷冻干燥,甲 醇浸取以及丙酮、氯仿和甲醇的连续粗提后,上氧化铝和硅胶柱层析可‘以有效地对024放线菌所产抗生素进行纯化。粗提制品的理化性质研究 表明,024放线菌所产抗生素为无色晶体,易溶于水,可溶于甲醇和乙 醇,且在甲醇中的溶解度较大,不溶或难溶于丙酮、氯仿、正丁”醇、乙 酸乙酯与苯。在有机溶剂中稳定性很强,在PH6E范围内有较强的抑菌 能力,在这一范围之外,活性急剧下降。紫外吸收峰在234urn处。
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