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目的：
探究青蒿琥酯对AZT联合高蛋白饲料饮食诱导的高血糖的影响，从而探讨青蒿琥酯作用于抗病毒药物所引起的糖代谢异常是否有效。
方法：
将c57BL/6j小鼠随机分为5组，每组6只，即正常对照组、AZT溶液联合高蛋白组(以下称模型组，Model)、二甲双胍(Met)治疗组、青蒿琥酯高剂量组治疗组(H-Are)、青蒿琥酯低剂量治疗组(L-Are)。正常组给予每天正常饮水，正常饲料喂养。模型组给予AZT溶液，高蛋白饲料喂养。二甲双胍灌胃，青蒿琥酯腹腔注射治疗。饲养6周，第6周检测空腹血糖，口服葡萄糖耐受、空腹胰岛素水平。取材前一天老鼠禁食不禁水约16小时，眼眶取血，离心后取血清放负80度冰箱;断颈处死老鼠，取左叶肝脏放冻存管后存于负80度冰箱，另取右叶放入福尔马林固定液中固定。HE染色观察肝脏组织结构变化，PAS(Periodic Acid-Schiff stain)染色，观察肝脏组织中糖原的堆积情况。采用聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction，RT-PCR)技术检测小鼠肝脏中胰岛素受体底物(INsR)、蛋白激酶B(PKB/AKt)、糖原合成激酶3β(GSK-3β)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、葡萄糖6磷酸酶(G6pase)的mRNA表达情况以及COXⅢ的表达来检测线粒体DNA的含量;ELISA检测肝脏组织中p-GSK-3β、GSK-3β及肝糖原的含量;蛋白印迹法检测肝组织中pAKt/AKt/PCK1/PYGL蛋白相对含量。
结果：
与正常组比较，模型组的FPG、OGTT的曲线下面积明显升高(P＜0.001、P＜0.01);GSK-3β蛋白含量较正常组显著升高(P＜0.001);肝糖原含量显著下降(P＜0.05)，p-GSK-3β显著下降(P＜0.001);GSK-3βmRNA的表达呈上升趋势，PEPCK、G6pase表达呈上升趋势;PCK1及PYGL蛋白表达呈下降趋势。PKB(AKt)mRNA表达及AKt、pAKt的蛋白表达呈上升趋势。经治疗后，二甲双胍和低剂量青蒿琥酯均可显著降低空腹血糖，其中二甲双胍（P＜0.001）和青蒿琥酯低剂量组（P＜0.01）效果更为显著。治疗后，空腹胰岛素水平和INsR改变不明显，肝糖原含量呈上升趋势，其中二甲双胍组和青蒿琥酯低剂量组较为显著;GSK-3β的蛋白含量，经治疗后呈下降趋势，尤其是二甲双胍组(P＜0.01)和青蒿琥酯低剂量组(P＜0.05)尤为显著;pGSK-3β含量经治疗后显著增加，特别是二甲双胍组(P＜0.05)和青蒿低剂量组(P＜0.05);青蒿琥酯组的PEPCK、G6pase表达呈下降趋势。PCK1的表达，经治疗后呈下降趋势，PYGL经治疗后呈上升趋势，其中青蒿琥酯低剂量组增加明显（P＜0.05）。治疗后，AKt活化下降，其中二甲双胍组（P＜0.05）及青蒿低剂量组(P＜0.05)尤为显著，pAKt的活性下降，其中青蒿低剂量组（P＜0.05）尤为显著。mtDNA含量，经治疗后有上升趋势明显，其中青蒿琥酯高剂量组尤为显著（P＜0.05）。
结论：
青蒿琥酯可显著降低AZT联合高蛋白饲料引起的高血糖，其机制可能与非AKt依赖的GSK-3β活性下降，糖原合成增加，和降低糖异生关键酶PEPCK、G6pase的表达有关及保护线粒体DNA有关。
探究青蒿琥酯对AZT联合高蛋白饲料饮食诱导的高血糖的影响，从而探讨青蒿琥酯作用于抗病毒药物所引起的糖代谢异常是否有效。
方法：
将c57BL/6j小鼠随机分为5组，每组6只，即正常对照组、AZT溶液联合高蛋白组(以下称模型组，Model)、二甲双胍(Met)治疗组、青蒿琥酯高剂量组治疗组(H-Are)、青蒿琥酯低剂量治疗组(L-Are)。正常组给予每天正常饮水，正常饲料喂养。模型组给予AZT溶液，高蛋白饲料喂养。二甲双胍灌胃，青蒿琥酯腹腔注射治疗。饲养6周，第6周检测空腹血糖，口服葡萄糖耐受、空腹胰岛素水平。取材前一天老鼠禁食不禁水约16小时，眼眶取血，离心后取血清放负80度冰箱;断颈处死老鼠，取左叶肝脏放冻存管后存于负80度冰箱，另取右叶放入福尔马林固定液中固定。HE染色观察肝脏组织结构变化，PAS(Periodic Acid-Schiff stain)染色，观察肝脏组织中糖原的堆积情况。采用聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction，RT-PCR)技术检测小鼠肝脏中胰岛素受体底物(INsR)、蛋白激酶B(PKB/AKt)、糖原合成激酶3β(GSK-3β)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、葡萄糖6磷酸酶(G6pase)的mRNA表达情况以及COXⅢ的表达来检测线粒体DNA的含量;ELISA检测肝脏组织中p-GSK-3β、GSK-3β及肝糖原的含量;蛋白印迹法检测肝组织中pAKt/AKt/PCK1/PYGL蛋白相对含量。
结果：
与正常组比较，模型组的FPG、OGTT的曲线下面积明显升高(P＜0.001、P＜0.01);GSK-3β蛋白含量较正常组显著升高(P＜0.001);肝糖原含量显著下降(P＜0.05)，p-GSK-3β显著下降(P＜0.001);GSK-3βmRNA的表达呈上升趋势，PEPCK、G6pase表达呈上升趋势;PCK1及PYGL蛋白表达呈下降趋势。PKB(AKt)mRNA表达及AKt、pAKt的蛋白表达呈上升趋势。经治疗后，二甲双胍和低剂量青蒿琥酯均可显著降低空腹血糖，其中二甲双胍（P＜0.001）和青蒿琥酯低剂量组（P＜0.01）效果更为显著。治疗后，空腹胰岛素水平和INsR改变不明显，肝糖原含量呈上升趋势，其中二甲双胍组和青蒿琥酯低剂量组较为显著;GSK-3β的蛋白含量，经治疗后呈下降趋势，尤其是二甲双胍组(P＜0.01)和青蒿琥酯低剂量组(P＜0.05)尤为显著;pGSK-3β含量经治疗后显著增加，特别是二甲双胍组(P＜0.05)和青蒿低剂量组(P＜0.05);青蒿琥酯组的PEPCK、G6pase表达呈下降趋势。PCK1的表达，经治疗后呈下降趋势，PYGL经治疗后呈上升趋势，其中青蒿琥酯低剂量组增加明显（P＜0.05）。治疗后，AKt活化下降，其中二甲双胍组（P＜0.05）及青蒿低剂量组(P＜0.05)尤为显著，pAKt的活性下降，其中青蒿低剂量组（P＜0.05）尤为显著。mtDNA含量，经治疗后有上升趋势明显，其中青蒿琥酯高剂量组尤为显著（P＜0.05）。
结论：
青蒿琥酯可显著降低AZT联合高蛋白饲料引起的高血糖，其机制可能与非AKt依赖的GSK-3β活性下降，糖原合成增加，和降低糖异生关键酶PEPCK、G6pase的表达有关及保护线粒体DNA有关。