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目的肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)属于一种高度异质性疾病,由不同的致病因子和遗传变异所致。目前HCC基因突变方面的研究取得了一定的进展,但我们对HCC基因突变图谱的描绘还远未完成,对HCC发病的关键驱动因素仍缺乏了解。本研究借助二代测序(Next-generation sequencing,NGS)技术,利用Illumina高通量测序平台,分析164名HCC患者癌组织基因突变特征,探讨HCC患者基因突变与临床病理因素之间的相关性。方法2017年1月至2018年12月因HCC于青岛大学附属医院实施肝切除术或穿刺活检术并对肿瘤组织及外周血样本进行基因检测患者共计164例。针对4um-10um的福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)的组织样本8-10片,以及作为胚系对照样本的外周血200-500ul,使用QIAGEN QIAamp○R DNA FFPE Tissue kit和QIAamp○R DNA Mini kit分别对组织和外周血样本提取基因组DNA。基因组分析在CAP认证实验室OrigiMed(中国上海)的实验室进行,450个关键癌症相关基因的所有编码外显子由定制杂交捕获,此外,增加探针密度以确保在保守的低读取深度区域中的高捕获效率。同时收集所用入组患者的临床和病理资料,突变基因与临床病理因素相关性的单因素分析采用c2检验,多因素分析采用Logistic回归分析。结果本研究中男性:146例,女性:18例,平均年龄56.3岁(27岁-78岁)。164例患者的肿瘤组织中共检测出突变基因1097个,突变频率较高的基因依次为TP53、TERT、CTNNB1、AXIN1、RB1、CCND1、TSC2等。突变形式包括单核苷酸位点变异,拷贝数变异,短片段或长片段插入缺失,基因重排/融合四种。单核苷酸位点变异为主要的变异形式,以C:G>T:A转换为主。P53通路、端粒修复途径、Wnt通路、PI3K/mTOR通路和细胞周期相关通路是HCC发生发展中最易突变的致癌途径。TP53基因突变与Edmondson分级III-IV级和微血管侵犯显著相关(P=0.000和P=0.000)。TERT基因突变与肝被膜侵犯显著相关(P=0.004)。TP53与TERT基因同时突变与Edmondson分级III-IV级、微血管侵犯和肿瘤侵犯肝被膜显著相关(P=0.011、P=0.015和P=0.006)。同CTNNB1基因未发生突变的患者相比,发生CTNNB1基因突变的患者,Edmondson分级I-II级和AFP≤20ng/mL所占比例明显升高((P=0.023和P=0.002)。Logistic回归分析显示:Edmondson分级III-IV级和微血管侵犯是TP53基因突变的危险因素(OR:2.807,95%CI:1.412-5.580,P=0.003;OR:2.774,95%CI:1.391-5.534,P=0.004);AFP≤20ng/mL是CTNNB1基因突变的危险因素(OR:0.402,95%CI:0.182-0.888,P=0.024);Edmondson分级III-IV级是TP53与TERT基因同时突变的危险因素(OR=2.265,95%CI:1.084-4.729,P=0.030)。结论本研究中HCC患者最易突变的基因次为TP53、TERT和CTNNB1等。突变形式以单核苷酸位点变异为主。P53通路,端粒修复途径,Wnt通路是HCC发生发展中最易突变的致癌途径。HCC的一些病理特征与发生突变的基因类型密切相关。这些发现有助于我们将HCC的生物学知识转化为临床实践,为HCC的个体化治疗提供新的靶点。