研究背景和目的利用脂肪来源干细胞（ADSCs）辅助脂肪移植有助于提高脂肪成活及减少并发症的可能,但以往研究表明间充质干细胞具有多潜能特性,被认为与肿瘤复发及转移有关。在乳癌术后不能完全排除癌细胞残留的情况下,ADSCs是否也促进肿瘤复发及转移,目前仍不明确,因此对ADSCs辅助脂肪移植乳房重建的安全性进行研究具有重要意义。我们利用三维培养和小鼠移植模型,观察ADSCs与MCF-7细胞间的相互作用,主要研究MCF-7细胞是否对ADSCs具有趋化作用和ADSCs能否促进MCF-7细胞成瘤及可能的潜在机制。方法一、ADSCs与MCF-7细胞体外三维共培养实验1、共聚焦激光扫描显微镜连续观察细胞趋化过程。2、观察两细胞共培养肿瘤球形成过程。3、扫描电镜观察两细胞共培养形态。4、两细胞共培养制备条件培养基（AM-CM）。5、巨噬细胞炎性蛋白-1δ（MIP-1δ）和MIP-3α表达检测。6、上皮（E-Cadherin）和间充质标记物（Vimentin）及肿瘤干细胞（CSC）标记物（Sox2和Oct4）检测。7、Transwell细胞迁移实验观察不同条件下ADSCs迁移率。二、ADSCs与MCF-7体内实验1、肿瘤小鼠模型制备和ADSCs体内归巢实验。2、裸鼠体内成瘤实验。三、统计学分析采用SPSS 22.0软件进行统计学分析。Student’s t-test比较不同时间点ADSCs或AM-CM与MCF-7细胞共培养基因表达的统计学意义。采用单因素方差分析对细胞迁移实验中ADSCs迁移率和体外肿瘤球直径进行多重比较,L-S-D post hoc分析比较组间差异。P<0.05为有统计学意义。结果1、ADSCs肿瘤趋化、趋化因子表达及ADSCs/MCF-7共培养细胞形态学表现两细胞共培养早期呈均匀分布;随后ADSCs接触并围绕MCF-7细胞;96h后,肿瘤球内部出现ADSCs。小鼠体内ADSCs荧光信号主要集中在肿瘤组织,其他器官几乎未见。细胞迁移实验,MCF-7和AM-CM相较于对照组显著促进ADSCs迁移。ADSCs/MCF-7细胞共培养组中MIP-1δ和MIP-3α的表达水平明显上升。扫描电镜下MCF-7细胞呈球形,聚集成表面不规则的肿瘤球,周围被ADSCs包围,ADSCs呈平展形态;高倍镜下两者出现紧密接触。2、上皮与间充质标记的表达和CSC标记物表达AM-CM培养的MCF-7细胞E-Cadherin表达降低,Vimentin表达增加,蛋白分析结果显示相似趋势;CSC标记物Sox2和Oct4表达明显增加。3、ADSCs促进MCF-7细胞肿瘤球生成和体内肿瘤形成体外肿瘤球形成,ADSCs组最强,AM-CM次之,单独MCF-7组最弱。体内,肿瘤体积ADSCs+MCF-7组明显大于单独MCF-7组;HE染色显示前者组织坏死区域明显缩小。结论1、ADSCs具有向MCF-7细胞趋化的表现,炎性趋化因子MIP-1δ和MIP-3α可能参与介导这一过程。2、ADSCs促进MCF-7细胞肿瘤球形成、上皮间质转化及向干细胞样细胞转化;同时在体内也可能促进MCF-7细胞肿瘤形成。