论文部分内容阅读
目的:本实验观察采用CIK细胞治疗鼻咽癌的近期临床疗效，并研究CIK细胞中Toll样受体mRNA（TLR1～TLR10）的表达情况，进一步阐述CIK细胞的抗瘤机制，评价CIK细胞临床过继免疫治疗的可行性。方法:1．选取符合条件的确诊中晚期初治鼻咽癌患者20例，以年龄、性别和治疗方法将他们随机分成实验组（放疗+化疗+CIK治疗）和对照组（放疗+化疗）。通过观察两组患者不同方法治疗后的生活质量、身体状况（饮食、睡眠及体重）及应用SDS、SAS对两组患者进行治疗前后的心理状况评价，同时观察患者对CIK细胞回输后的临床反应。计量资料用χ±s表示，采用配对t检验。2．抽取健康志愿者静脉血，采用Ficoll淋巴分离液密度离心法分出PBMC，参考文献报道标准的CIK细胞培养方法培养CIK细胞生成。3．分别于第3天、6天、9天、12天、15天用细胞计数板计数法计算CIK增殖细胞数量，于第15天用流式细胞仪检测CIK细胞表面CD3、CD56分子的表达情况，用RT-PCR法分别检测PBMC和CIK细胞第9天、12天、15天TLR1～TLR10的mRNA表达情况。结果1、鼻咽癌患者经CIK细胞回输后，与单纯放化疗对照组相比，实验组的生活质量、身体状况及精神、心理状况明显改善。2、PBMC经多种细胞因子（INF-γ、IL-2、IL-1β、MabCD3等）刺激后，第6天开始明显增殖，第15天左右细胞增殖达高峰，流式细胞仪检测细胞表面CD3、CD56显示成功培养成CIK细胞。3、CIK细胞与对照组外周血单个核细胞（PBMC）相比，TLR1～TLR10的表达存在差异：PBMC中TLR均有不同程度的表达；在CIK细胞中TLR1的表达增强，TLR4的表达减弱；TLR9在两种细胞均有较高的表达。结论1．CIK细胞能够提高鼻咽癌患者的生活质量、身体状况及精神、心理状态，无明显不良反应。进一步证明CIK细胞过继免疫治疗对提高肿瘤患者生活质量、精神状态及免疫力方面具有独特的优势，可作为肿瘤放化疗的辅助治疗方案。2．TLR在PBMC及CIK细胞中的表达具有选择性，CIK细胞的杀瘤活性可能与TLR的表达相关。