论文部分内容阅读
目的：(1)研究正常大鼠视网膜中基质金属蛋白酶3(Matrix metalloproteinase3, MMP3)的定位以及在急性眼高压后大鼠视网膜中的表达情况,(2)检测MMP3对急性眼高压后视网膜节细胞存活的影响。方法：所有的SD大鼠被随机分成正常对照组、假手术组、急性眼高压组、急性眼高压+药物组和急性眼高压+溶剂组。急性眼高压组的大鼠前房通过注射无菌生理盐水升高眼内压至110mmHg并维持60min后缓慢降压；急性眼高压+药物组和急性眼高压+溶剂组大鼠在前房注射生理盐水前30min腹腔注射NNGH (N-Isobutyl-N-(4-methoxyphenylsulfonyl)glycyl hydroxamic acid,一种MMP3高灵敏度抑制剂)和3%DMSO,之后以1次/8h给药1d。；对照组大鼠不做任何处理；假手术组大鼠刺穿角膜后压力维持在20mmHg,不加压。动物分别存活6h、1d、3d、7d后处死。用western blotting、免疫组织化学、免疫荧光和免疫荧光双标来检测MMP3在正常成年大鼠视网膜中的分布和它对急性眼高压后视网膜节细胞存活的影响。结果：1：MMP3在正常成年大鼠视网膜中其阳性产物主要分布在神经纤维层、节细胞层、内网层、内核层和外网层的神经元和神经胶质细胞中。MMP3阳性产物在节细胞层与NeuN阳性产物明显双标；在内核层边缘部与部分Calbindin阳性产物和Parvalbumin阳性产物双标；在内网层和内核层与PKC-α阳性产物双标；MMP3阳性产物在内外网层与Synaptophysin阳性产物明显双标；而在外核层MMP3的阳性产物与Rhodopsin阳性产物没有明显双标；在节细胞层和神经纤维层中,MMP3与GFAP阳性产物明显双标,与部分GS阳性产物双标；在内网层中,与部分CD11b阳性产物双标。2:急性眼高压后MMP3的表达在早期呈现升高的趋势,在3d时达到顶峰,然后下降。3:NNGH干预后,大鼠视网膜中MMP3的表达在急性高眼压1d和3d时与单纯高眼压组相比明显降低,而大鼠视网膜中的节细胞数目在急性高眼压3d时与单纯高眼压组相比明显增加。结论： MMP3定位于成年大鼠视网膜的神经元和胶质细胞中,急性眼高压后大鼠视网膜MMP3表达上调,可能参与视网膜节细胞的丢失。