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目的对膝关节前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)胫骨止点进行组织学三维重建,根据未钙化纤维软骨(uncalcified fibrocartilage,UF)和钙化纤维软骨(calcified fibrocartilage,CF)的空间结构和变化规律的差异来划分ACL功能束,为实验研究和临床手术重建提供新的方法和依据。材料和方法1、材料: 4例新鲜成人尸体正常膝关节标本番红O/固绿液(safranin’o/fast green)染色剂(上海生工公司) BX50F4型Olympus显微镜(日本) Alpha As-808P型CCD摄像头(日本) Photoshop8.0.1图像处理软件(美国) Amira4.1.1三维重建软件(美国)2、方法:(1)测量ACL胫骨止点在胫骨平台上的位置。(2)距离胫骨平台4mm处水平切断ACL,并沿止点边缘取下止点,带松质骨2mm,常规固定、脱钙、脱钙、脱水、石蜡包埋,连续水平切片,层厚8μm,层距100μm,番红O/固绿液(safranin’o/fast green)染色,光镜下观察及摄片,Photoshop8.01软件进行图像拼接。(3)图像轮廓勾描,根据组织类型用不同灰度值填充,将图像导入Amira4.1.1,并进行三维重建。结果1、ACL胫骨止点与胫骨平台上前后内外缘的距离分别为:7.36mm-9.67mm,16.68mm-18.61mm,31.75mm-35.61mm,32.57mm-36.15mm。2、ACL胫骨止点四层结构移行过程不均一,前内侧和后内侧部分移行层面较高,前外侧和后外侧部分移行层面较低。3、三维重建结果提示ACL胫骨止点UF厚度和变化规律有较大差异的趋势;CF形态是锯齿状的,各部分CF形态无明显差异。结论1、根据ACL胫骨止点UF、CF空间结构和变化规律的差异趋势将ACL划分为内侧束和外侧束,内侧束为主要承力纤维束,前内侧纤维束为受力峰值纤维束。2、ACL手术重建应进行双束重建,内侧束应重建前内侧受力峰值纤维束,胫骨隧道内口定位中心点应为本身止点几何中心点向内偏约250-330,距离为止点前后径一半除以内偏角度的余弦值乘以0.45;而外侧束中心点为前内侧峰值纤维束定位点关于ACL胫骨止点中心的对称点。