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目的:观察miR-181a及靶基因Caprin-1在胃癌组织及胃癌细胞系中表达变化,在胃癌细胞系SGC7901细胞分别过表达和抑制miR-181a,观察靶基因Caprin-1表达变化,明确miR-181a对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭变化的影响;进一步在SGC7901细胞分别过表达和抑制Caprin-1,明确Caprin-1对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭变化的影响,通过荧光素酶实验验证miR-181a对Caprin-1的调控作用,探讨miR-181a及靶基因Caprin-1在胃癌中的作用及机制,为胃癌的临床治疗提供理论依据。方法:（1）标本收集及细胞系购买:收集潍坊医学院附属医院病理科胃癌组织90例,以癌旁正常组织标本作为对照;胃癌细胞MKN45、SGC-7901、MGC803、BGC-823及常胃上皮细胞GES-1均购自ATCC公司。（2）miR-181a的检测:应用RT-PCR技术检测miR-181a在胃癌组织及胃癌细胞系中的表达变化,以癌旁正常组织标本及正常胃上皮细胞作为对照。（3）靶基因预测:通过miRanda,TargetScan和Microcosm三大软件预测miR-181a下游的靶基因。（4）靶基因Caprin-1的检测:应用RT-PCR和Western-blot技术检测Caprin-1在胃癌组织及胃癌细胞系中的表达变化;（5）细胞培养及转染:从液氮罐中复苏冻存细胞至培养瓶中;24小时后更换培养基;将生长至80%-90%的细胞弃去旧培养基,制成细胞悬液;将1×105细胞悬液接种于6-well培养板中,37℃,5%CO2培养箱培养至细胞密度度达到约60%80%,进行质粒转染;（6）干预胃癌细胞中miR-181a,胃癌细胞生物学行为检测:取SGC-7901胃癌细胞,分别转染miR-181a up质粒和miR-181a down质粒,通过EDU、CCK-8实验检测细胞增殖变化,通过tunel及Western-blot技术检测细胞凋亡变化,伤口愈合实验检测细胞迁移能力,transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,以空载体作为对照。（7）miR-181a对SGC-7901细胞中Caprin-1调控检测:取SGC-7901胃癌细胞,分别转染miR-181a up质粒和miR-181a down质粒,检测Caprin-1在mRNA和蛋白质水平上的表达变化。（8）干预胃癌细胞中Caprin-1后,胃癌细胞生物学行为检测:取SGC-7901胃癌细胞,分别转染pEGFP-Caprin-1过表达质粒和Caprin-1siRNA,通过EDU、CCK-8实验检测细胞增殖变化,以tunel及Western-blot技术检测细胞凋亡变化,伤口愈合实验检测细胞迁移能力,transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,以空载体作为对照。（9）荧光素酶报告基因:以293T细胞和SGC-7901为工具细胞,分别将Caprin-1 3’UTR质粒与Caprin-1 3’UTR-Mut质粒与miR-181a-up、miR-181a-down和各自对照质粒共转染到293T细胞和SGC-7901胃癌细胞。实验分为8个组,转染48 h后分别检测各组荧光素酶的活性。结果:（1）miR-181a在胃癌组织及胃癌细胞系中的表达变化:RT-qPCR结果显示,与癌旁正常组织比较,胃癌组织中miR-181a表达水平明显升高,差异具有统计学意义（P<0.001）;胃癌细胞系MKN45、SGC-7901、MGC803及BGC-823中,miR-181a的丰度均高于正常胃组织细胞GES-1,其中在SGC-7901细胞丰度最高,差异具有统计学意义（P<0.05）。（2）靶基因预测结果:通过多种件预测miR-181a下游的靶基因,得知Caprin-1是miR-181a的一个靶基因。（3）Caprin-1在胃癌组织及胃癌细胞系中的表达变化:RT-qPCR结果显示,与癌旁正常组织比较,胃癌组织中Caprin-1在mRNA水平降低,差异具有统计学意义（P<0.05）;Western-blot结果显示,与癌旁正常组织比较,胃癌组织中Caprin-1蛋白表达降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。RT-qPCR结果显示,胃癌细胞系MKN45、SGC-7901、MGC803及BGC-823与正常胃组织细胞GES-1比较,Caprin-1mRNA表达明显下调,差异具有统计学意义（P<0.05）。Western-blot结果显示,与正常胃组织细胞GES-1比较,胃癌细胞系MKN45、SGC-7901、MGC803及BGC-823,Caprin-1蛋白含量均降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。（4）miR-181a对SGC-7901细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响:转染miR-181a up质粒48 h,EDU结果显示SGC7901细胞增殖能力增强;Tunel结果显示SGC7901细胞凋亡数量减少,凋亡蛋白Caspas3和Caspas9表达降低;伤口愈合实验结果显示,过表达miR-181a,SGC7901细胞迁移能力明显增强;transwell侵袭实验发现,过表达miR-181a,SGC7901细胞侵袭能力明显增强。差异均具有统计学意义（P<0.05）。转染miR-181a down质粒,抑制SGC7901细胞中miR-181a的表达,同样进行上述细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭实验,结果显示与转染空载体组比较,SGC7901细胞得增殖能力下降,凋亡细胞数量增多,细胞迁移及侵袭能力受到抑制,差异同样具有统计学意义（P<0.05）。（5）miR-181a对SGC-7901细胞中Caprin-1表达变化的影响:结果显示转染miR-181a down组较对照Caprin-1在mRNA和蛋白水平的表达均升高,差异具有统计学意义（P<0.05）。转染miR-181a up组较对照Caprin-1在mRNA和蛋白水平的表达均降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。（6）Caprin-1对SGC-7901细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移变化:转染pEGFP-Caprin-1和Caprin-1 siRNA,转染后72 h,检测胃癌细胞增殖凋亡变化,Western-blot检测凋亡蛋白变化;于转染后24h、48h、72h后检测细胞迁移变化,转染72h后检测胃癌细胞侵袭能力。结果显示转染Caprin-1 siRNA组较对照组胃癌细胞SGC7901增殖加快、凋亡减弱、侵袭和迁移能力明显加强,差异具有统计学意义（P<0.05）。转染pEGFP-Caprin-1组则与对照组有相反的实验效果,差异同样具有统计学意义（P<0.05）。（9）双荧光素酶检测报告验证Caprin-1是mir-181a的靶基因:双荧光素酶报告基因检测显示,在293T细胞和SGC-7901细胞中,共转染Caprin-1 3’UTR+miR-181a up质粒组与共转染Caprin-1 3’UTR-MUT+miR-181a up组比较,双荧光素酶强度比值明显降低（P<0.01）,而共转染Caprin-1 3’UTR+miR-181a down质粒组与共转染Caprin-1 3’UTR-MUT+miR-181a down组比较,双荧光素酶强度比值明显升高（P<0.01）,确定Caprin-1是miR-181a的靶基因。结论:（1）miR-181a及Caprin-1在胃癌组织及胃癌细胞系有差异性表达,表明miR-181a及Caprin-1与胃癌发病密切相关;（2）miR-181a通过靶基因Caprin-1促进胃癌细胞增殖、迁移与侵袭,抑制了胃癌细胞凋亡。