【研究背景】地中海贫血最初于1925年被Cooley和Lee病例报道,最早发现于地中海地区,又被称为海洋性贫血或珠蛋白生成障碍性贫血。全球约2%的人群为地中海贫血基因的携带者,该疾病在我国南方地区高发,其中广西和广东的人群携带率分别约为23.98%（2010年）和11.07%（2004年）。地中海贫血是严重威胁人类健康的血液病,其遗传方式为常染色体隐性遗传,可根据肽链合成减少,将地中海贫血分为α-地中海贫血、β-地中海贫血、γ-地中海贫血、δ-地中海贫血、δβ-地中海贫血和εγδβ-地中海贫血等,常见的地中海贫血主要为α-地中海贫血和β-地中海贫血两种。在临床上,可根据贫血的严重程度将地中海贫血分为轻型（携带者,表型正常）、中间型和重型。轻型的地中海贫血携带者的血液学检查结果体现为轻微的小细胞、低色素性贫血,中间型患者有明显贫血症状并且需要不定期输血,重型地中海贫血患者会出现水肿胎（α-地中海贫血）或随生长发育黄疸,肝脾肿大逐渐加重,不加治疗情况下,患儿多于5岁前死亡（β-地中海贫血）。人类珠蛋白基因是地中海贫血主要的致病基因,20世纪70年代末,α-珠蛋白基因和β-珠蛋白基因前后被定位,随后探究出人类珠蛋白基因以基因簇的模式表现,α-珠蛋白基因簇定位于16号染色体16p13.3位点,β-珠蛋白基因簇定位于11号染色体11p15.5位点,成人的α-珠蛋白主要由α1和α2基因编码组成的（分别对应HBA1基因和HBA2基因）,β-珠蛋白则由β基因编码而成（即HBB基因）。地中海贫血迄今尚无有效的治疗方法,其中富有前途的治疗方法有基因治疗和骨髓干细胞移植,而其防治的基本措施是做好一级诊疗,即对夫妇双方均进行地中海贫血基因筛查,对有可能携带者地中海贫血的胎儿进行产前基因诊断,防患于未然,有效预防该病患儿的出生。目前地中海贫血的基因检测方案是先进行地中海贫血初筛,满足（Hb）<110 g/L,（MCH）<27 pg,（MCV）<80 fl时,进行血红蛋白电泳检测,检测出异常血红蛋白或血红蛋白A2（HbA2）含量异常时,再进行常规的基因诊断。因此,对此病深入研究和增加罕见型地中海贫血的检测是非常必要的,特别是在传统检测方案对部分静止型地中海贫血造成漏诊时的情况。【目的】首先随着国家经济的发展,人口流动加剧,以及婚育制度的改革,以前报告的广东省地中海贫血的数据已经没有实际参考价值,因此对近年广东地区的地中海贫血携带者进行重新摸查对于该地区的地中海贫血的临床检测、治疗和疾控具有重要意义;其次,针对目前临床检测在静止型地中海贫血造成的漏诊较多,建立一套准确、简便且临床可行的检测标准方案具有重要的现实意义;第三,通过对地中海贫血的筛查,发现罕见型别的地中海贫血家系,对他们进行跟踪研究,丰富地中海贫血的流行病学资料,为将来对广东地区地中海贫血患者更精准地诊疗和产前诊断提供重要参考。【方法】研究对象来源于2014年1月1日至2019年8月31日在广州医科大学附属第三医院生殖医学中心与产前诊断科行地中海贫血检测的夫妇、先证者患儿及胎儿,生殖医学中心对患者进行地中海贫血基因普查,共计30072例地中海贫血的外周血基因诊断及2795例胎儿产前诊断。所有样本都进行地中海贫血筛查（血常规,血红蛋白电泳）及基因检测,当检测出异常血红蛋白或血红蛋白A2（HbA2）含量异常时,可结合跨越断裂点PCR（Gap-PCR）,反向点杂交（RDB-PCR）和测序等技术进行基因分型和结果诊断,对于常规方法未检出异常而地中海贫血筛查提示阳性,进一步检测罕见型地中海贫血。为避免漏诊造成中重型患儿出生,我院生殖科同时安排病人做以上地中海贫血基因检测。需要对胎儿地中海贫血基因型进行检测的,选择对中孕期孕妇实施羊水穿刺,通过提取羊水细胞DNA,使用上述方法进行诊断。【结果】本次研究通过对本院就诊的潜在患者共30072例外周血和2795例产前样本进行地中海贫血的基因检测,外周血样本共检出地中海贫血基因阳性5945例,总阳性率为19.77%。其中α-地中海贫血外周血检出4554例,阳性率为15.14%。β-地中海贫血外周血检出1199例,阳性率为3.99%。α合并β地中海贫血外周血检出192例,阳性率为0.64%。1.常见型α地中海贫血检出分布:外周血样本中,检出静止型1523例（占33.81%）,轻型2807例（占62.31%）,中间型174例（占3.86%）,重型1例（占0.02%）;在2795例胎儿产前诊断中,检出静止型405例（占21.57%）,轻型971例（占51.70%）,中间型138例（占7.35%）,重型364例（占19.38%）。2.常见型β地中海贫血检出分布:外周血样本中,检出轻型1110例（占96.77%）,中间型22例（占1.92%）,重型15例（占1.31%）;产前样本中,检出轻型721例（占72.32%）,中间型27例（占2.71%）,重型249例（占24.97%）。3.常见型α合并β地中海贫血检出分布:外周血样本中,检出192例,静止型α地中海贫血合并β⁺/β^N共25例（占13.02%）,静止型α地中海贫血合并β⁰/β^N共57例（占29.69%）,轻型α地中海贫血合并β⁺/β^N共26例（占13.54%）,轻型α地中海贫血合并β⁰/β^N共84例（占43.75%）;产前样本中,检出142例,静止型α地中海贫血合并β⁺/β^N共7例（占4.93%）,静止型α地中海贫血合并β⁰/β^N共39例（占27.47%）,轻型α地中海贫血合并β⁺/β^N共21例（占14.79%）,轻型α地中海贫血合并β⁰/β^N共64例（占45.07%）,血红蛋白H病合并β地中海贫血携带6例（占4.23%）,Bart’s水肿儿合并β地中海贫血携带2例（占1.41%）,中重型β地中海贫血合并α地中海贫血携带3例（占2.11%）。4.罕见型α-、β-地中海贫血检出分布:外周血样本中,检出48例罕见型α-地中海贫血（4例缺失型,44例非缺失型）和52例罕见型β-地中海贫血（8例缺失型,44例非缺失型）;产前样本中,检出1例罕见型α-地中海贫血缺失。【结论】首先,本研究对广东地区近五年地中海贫血进行了大样本的筛查和诊断,丰富了该地区地中海贫血的流行病学特征,本研究的主要发现如下:1、广东地区人群α-地中海贫血突变携带率高于β-地中海贫血;2、突变类型占比也符合中国南方人群突变频率特征,其中α-地中海贫血主要为东南亚SEA缺失型(--^SEA/αα),3.7 kb右缺失型(-α^3.7/αα)和4.2 kb左缺失型(-α^4.2/αα)这三种缺失类型。β-地中海贫血在本研究中高发的突变类型依次为β^CD41-42/β^N,β^IVS-II-654/β^N,β^-28/β^N和β^CD17/β^N。罕见型α-地中海贫血主要为:IVS-II-55和αααHK,罕见型β-地中海贫血在本研究中高发的突变类型为:Hb New York和CD22。再而,本研究使用地中海贫血筛查与常规基因诊断相结合的方案,优化了临床地中海贫血的检测流程,大大提高了静止型地中海贫血和罕见家系的检出率,为将来能在临床检验普遍开展新的检验手段提供了参考依据。总之,本研究结果可以为广东地区地中海贫血患者的临床诊疗、孕儿产前诊断或生殖遗传咨询提供重要参考。