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儿茶酚胺是细胞体内传播神经冲动的重要递质,具有重要的生理功能,与神经活动、行为以及大脑皮层的醒觉和睡眠节律都有关系。因而,建立儿茶酚胺的快速、灵敏、准确的检测方法,可为疾病的诊断和治疗以及疾病的机理研究提供依据。
本研究进行了如下两个方面的工作:
一、建立儿茶酚胺HPLC-ECD的检测方法并检测唾液中去甲肾上腺素的含量
优化色谱条件,调节离子对试剂浓度,分离儿茶酚胺(去肾上腺素NE、肾上腺素E和多巴胺DA)标准品的色谱峰。检测儿茶酚胺标准溶液HPLC-ECD的线性范围在5-300 ng/mL,日内精密度和日间精密度良好,检出限(信噪比3:1)依次为1.5ng/mL(NE)、1.0ng/mL(E)和1.0ng/mL(DA)。NE平均加样回收率为96.7±2.0%。所检测的四份被试唾液中去甲肾上腺素含量分别为62、56、22、95 ng/mL。
二、应用磁性纳米颗粒富集提纯儿茶酚胺
实验合成了三种磁性纳米颗粒:裸的γ-Fe2O3(MNPs)、DMSA包覆γ-Fe2O3(DMSA@MNPs)以及磺化壳聚糖包覆的γ-Fe2O3(HSO3-CS-DMSA@MNPs)。这些磁性纳米颗粒通过静电作用富集提纯儿茶酚胺。其富集原理是pH>6.0时,溶液中的磁性纳米颗粒表面带负电荷,而儿茶酚胺以R-NH3+(pKb=8.5~9.5)形式存在,二者静电吸附形成稳定结构。
三种磁性纳米颗粒富集儿茶酚胺的富集率由低到高的顺序为MNPs
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