大体积细胞支架制备与表面改性研究Q

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组织工程学融合了工程学和生命科学的基本原理、技术和方法,在体外构建一个有生物活性的种植体,植入体内以修复组织缺损,重建组织或器官功能。其科学意义不仅在于为解除病人痛苦提供了一种新的治疗方法,更重要的是提出了复制“组织”、“器官”的新思想,它标志着“生物科技人体时代”的到来,是“再生医学的新时代”,是“一场意义深远的医学革命”。组织工程涉及种子细胞、细胞支架、组织构建三方面的内容。细胞支架,不仅影响细胞的生物学行为和培养效率,而且决定着移植后,能否与机体良好的适应、结合和修复,是限制组织工程应用于临床的一个关键因素。研制孔隙率高、孔隙连通性好、物化性能满足生物功能要求的细胞支架具有重要意义。 本文针对细胞支架制备方法中存在的不足,采用溶液分散法制备出不同孔径的氯酸钠球形致孔剂,利用改进的溶液浇注/粒子沥滤技术(致孔剂粘结-溶液注入/粒子沥滤技术),制备聚乳酸细胞支架,探讨了制备条件对支架孔隙结构、形态的影响;将明胶杂化表面改性方法改良后应用于三维聚乳酸支架上,研究了支架立体改性技术,主要探讨了支架表面预处理方法和条件,明胶溶液在支架上的附着、交联对支架孔隙结构、亲水性等的影响;观测支架的体外降解行为,探讨影响支架降解的因素。利用分光光度法建立了小体积溶液酸度测定方法,测定降解过程中支架内部溶液的酸度。 本实验制备出了孔隙率达95%以上,直径为0.818±0.029cm, 高为0.260±0.028cm的圆柱形多孔聚乳酸支架,支架内部孔隙形态规则、孔隙连通、整体均匀性好,从而证明致孔剂粘结--溶液注入/粒子沥滤技术是一种快速、实用的、能构建满足组织工程需求的聚乳酸细胞支架的方法。明胶杂化改性后支架吸水率由改性前的(1198.87±374.77)%上升到(1944.90±334.88)%,增加了近2倍,说明明胶杂化能显著提高聚乳酸细胞支架的亲水性;扫描电镜观察表明,改性后明胶仅分布在聚乳酸支架孔隙表面,支架孔隙形态、结构、连通性基本没有改变,表明明胶杂化方法是在利用致孔剂粘结-溶液注入/粒子沥滤技术制得支架基础上,制备出集天然材料与合成材料优势于一体的亲水性好、内部结构可控、孔隙率高、孔隙连通性好的细胞支架的,具有很大潜力的改性技术。建立了分光光度法测定小体积溶液酸度的方法,为正确评价支架降解过程中微环境的酸度变化规律,提供了一种稳定、准确、精密度高而又简便、可行的测试技术。支架体外降解测定结果表明,降解温度、降解介质,对支架的失重和分子量等性能的变化规律有较大影响。支架降解过程中,内部与外部溶液酸度及其变化规律基本一致的实验结果,表明了支架的内部与外部降解介质具有良好的流通性质,从而进一步证实了支架具有良好的孔隙间连通性。 综上所述,利用明胶杂化改性技术结合致孔剂粘结---溶液注入/粒子沥滤技术,可以制备出亲水性良好、孔隙分布均匀、孔隙率高、连通性好的多孔细胞支架,该支架性能能满足组织工程需求,在组织工程中具有广泛的应用价值。小体积溶液酸度测定方法是一种具有潜在价值,可用于测定降解过程中支架内外降解液酸度的实用方法。
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