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本研究分为两部分。
第一部分 白内障超声乳化术后血流动力学改变的临床研究
目的:观察白内障超声乳化并人工晶状体植入术后患者的球后血管血流动力学的变化情况。
方法:前瞻性对照研究。选取2011年6月至2011年11月于我院行单眼白内障超声乳化吸除并植入人工晶状体的患者共45例。研究对象收录标准:无其他眼部疾病(除白内障);无全身系统性疾病;年龄>60岁。根据患者病史及入院时血压分为高血压组和正常血压组。分别于术前、术后4小时,术后1天行彩色多普勒超声成像系统(color Doppler imagining,CDI)检查患者眼球后血管血流改变状态。检测指标包括视网膜中央动脉(CRA)、睫状后动脉(PCA)、眼动脉(OA)血管的最大收缩期血流速度(PSV)、舒张末期血流速度(EDV)、阻力指数(RI)。同时记录患者术中血压,累积能量复合参数,术后不同时间点眼压变化。基本参数比较采用配对T检验,不同时间点血流改变比较采用Mann-Whitney Test方法。
结果:患者平均年龄为74±6.78岁。术中平均动脉压为99.13±17.4mmHg,平均有效超声能量为9.504±2.64。高血压组平均动脉压明显高于正常血压组(134±7.1 vs120.8±8.9).两组术前、术中、术后时间点,平均动脉压平稳,未见显著性差异。两组球后血流RI在各时间点未见明显改变。高血压组和正常血压组的球后血管PSV(眼动脉、睫状后动脉、视网膜中央动脉)术前,术后4小时,术后一天比较,未见统计学差异。高血压组的睫状后动脉EDV值在术后4小时较术前有显著性差异(3.20±0.92vs3.62±1.15,p<0.05)其余各组均未见统计学差异。
结论:正常老年白内障患者中白内障超声乳化并人工晶状体植入术对球后血流动力学影响较小。高血压老年患者术后早期睫状后动脉舒张期流速下降可能是高血压老年患者术后视网膜血供不足的潜在威胁。
第二部分 实验性急性眼内压波动对视网膜损伤及其机制的研究
目的:研究急性波动性眼内压对视网膜结构及功能的影响,探讨星形胶质细胞在急性波动性眼压在视网膜损伤中的作用。
方法:通过前房灌注的方式制作急性高眼压模型。成年SD大鼠和青紫蓝兔各75只,根据前房灌注的不同灌注压,灌注速度,分别按完全随机设计分为正常对照;恒定高眼压组(灌注压100mmHg,灌注时间10min);急性眼压波动组(灌注压100-80mmHg,灌注时间10min,灌注频率5s/cycle)。各组分五个不同时间点:灌注前,灌注后4h、灌注后8h、灌注后24h及灌注后7天。获取灌注前后眼底彩色照片,以视盘定位,采用image pro plus4.0图像分析软件测量视网膜血管直径改变。在灌注过程中测量青紫蓝兔平均动脉压改变。对在各时间点对大鼠和青紫蓝兔进行视网膜电图检查后,取视网膜,采用免疫荧光及Western blot方法检测神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)蛋白、connexin43蛋白的表达,Real-timePCR检测C-FOS和connexin43 mRNA的表达,采用Bm3a染色技术检测神经节细胞数目的改变。
结果:各组视网膜电图结果未见显著性差异,各组视网膜神经节细胞形态数目均未见异常。免疫荧光染色显示,恒定高眼压组和急性眼压波动组GFAP的表达均明显高于对照组(分别为P<0.05及P<0.01)。Western blot实验结果同样表明GFAP在恒定高眼压组和急性眼压波动组表达明显升高(P<0.05)。Western blot实验还发现恒定高眼压组和急性眼压波动组GFAP的表达均明显高于对照组(P<0.05)。与对照组比较,Real-time PCR结果显示,恒定高眼压组和急性眼压波动的C-FOS mRNA和connexin43 mRNA在灌注后4小时开始升高,灌注后8小时达到高峰(分别为P<0.05及P<0.01),而在灌注后24小时恢复正常。
结论:急性波动性眼内压可诱导星形胶质细胞的增生反应以及连接蛋白connexin43的高表达,但这种应对变化还未对视网膜神经节细胞的功能和结构造成损伤。C-FOS可能在视网膜对急性波动性眼内压升高的应对反应中起关键作用。