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结核病（tuberculosis，TB）是传染性疾病中第二大致死性疾病。目前多药耐药结核（multidrug-resistant tuberculosis，MDR-TB）和广泛耐药结核（extensivelydrug-resistant tuberculosis， XDR-TB）的流行以及合并感染艾滋病（humanimmunodeficiency virus，HIV）都给TB的控制带来了巨大的挑战，甚至已出现了对所有抗结核药耐药的超级结核杆菌，TB已成为人类健康和生命安全的重大威胁。在过去四十多年间，几乎没有新的抗结核药物出现，目前只有不超过10个化合物进入了Ⅱ期临床。硝基咪唑类似物PA-824和OPC-6783作为分枝菌酸合成抑制剂，对敏感及耐药的结核杆菌均有效，且能杀灭潜伏期的结核杆菌，单用及合用时均表现出良好的活性。与一线抗结核药物无交叉耐药现象。PA-824则作为一种新的活性组分，与莫西沙星、吡嗪酰胺组成一种新的复方制剂（PaMZ），目前处于临床Ⅱ期研究中，研究表明其对多药耐药结核菌感染的治疗有良好的应用前景。PA-824由Pathogenesis公司合成，其合成路线中采用了硅保护基以及大量的四丁基氟化铵等试剂，价格高昂。我们对其合成路线进行优化，提高产率，使其简便易行。PA-824与莫西沙星、吡嗪酰胺作为新的复方制剂用于治疗肺结核，三药合用是否存在药物相互作用（Drug-drug Interaction，DDI）呢？DDI对于PaMZ的临床应用将会产生何种影响？我们建立了大鼠血浆中PA-824、莫西沙星、吡嗪酰胺的LC-MS/MS测定方法，考察了三药单用及合用的药代动力学变化。一、PA-824的合成本路线以4-硝基咪唑为原料，经过硝基化及热重排反应，得到2,4-二硝基咪唑。2，4-二硝基咪唑与(S)(+)-缩水甘油丁酸酯在氮气保护下反应开环得到(S)-1-(叔丁基二甲基硅氧基)-3-(2,4-二硝基-1H-咪唑-1-)丙-2-醇，然后用四氢-2H-吡喃(DHP)保护醇羟基，在碳酸钾的作用下关环，用盐酸脱保护后与4-三氟甲氧基溴苄反应生成终产物，淡黄色固体粉末PA-824。总收率32%。最终产物经过1H NMR，13C NMR，HRMS鉴定确认，高效液相检测纯度达到99%。二、PA-824、莫西沙星和吡嗪酰胺单用及联合应用在大鼠体内的药代动力学研究1LC-MS/MS测定SD大鼠血浆中的PA-824、莫西沙星、吡嗪酰胺方法的建立建立了以甲硝唑为内标，经甲醇沉淀蛋白，富集生物样品中的PA-824、莫西沙星、吡嗪酰胺，然后进行LC-MS/MS检测的方法，内源性物质不干扰待测物和内标的测定。色谱柱为Inertsil ODS3C18column（150mm×4.6mm，5μm）；C18保护柱（50mm×4.6mm，江苏汉邦），流动相为甲醇-0.03%三乙胺水溶液（85︰15），流速为0.5mL/min，采用电喷雾电离源（ESI）），正离子多反应监测（MRM）扫描分析，PA-824、莫西沙星、吡嗪酰胺和内标的离子选择通道分别为m/z360.1→m/z175.1（CE=65.11，DP=35.11），m/z402→m/z384，260.1（CE=40，DP=130），m/z124→m/z78.2，81.2（CE=26，DP=38），m/z172→m/z128（CE=19，DP=50）。本方法三种药物的平均回收率均大于85%，日内与日间精密度（RSD）均小于10%，PA-824在0.1~10.0μg/mL范围内呈线性关系，莫西沙星在0.1~20.0μg/mL范围内呈线性关系，吡嗪酰胺1.0~50.0μg/mL范围内呈线性关系，此方法快速准确，灵敏度高，可应用于PA-824、莫西沙星、吡嗪酰胺以及三药联用的药代动力学研究。2血浆药物浓度-时间曲线的研究2.1PA-824，莫西沙星，吡嗪酰胺和三药联用在SD大鼠体内的药代动力学研究四组SD大鼠分别灌胃给药,等摩尔剂量的PA-824（20mg/kg），莫西沙星（40mg/kg），吡嗪酰胺（160mg/kg），三药联用（PA-824：20mg/kg，莫西沙星：40mg/kg，吡嗪酰胺：160mg/kg），考察药物在SD大鼠血浆中的吸收动力学特征。结果显示，三种药物在大鼠体内的吸收与之前文献报道基本一致，三种药物在大鼠体内吸收分布较快，消除较慢。2.2口服PA-824，莫西沙星，吡嗪酰胺和三药联用在SD大鼠体内的药代动力学性质比较比较单独给药组与联合给药组的主要药代动力学参数发现，三药联用组PA-824的C-T曲线下面积AUC（0-t）比单独给药组增大1.38倍，Cmax增大1.83倍，CLz/F下降了33%，Tmax减小23%；三药联用组莫西沙星的C-T曲线下面积AUC（0-t）比单独给药组增大1.39倍，Cmax增大1.61倍，CLz/F下降了23%，Tmax无变化；吡嗪酰胺联用组药代动力学参数基本没有变化。