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研究目的:研究重组人粒细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte colonystimulating factor,rhG-CSF)对快速老化模型小鼠P10(senescence acceleratedmouse/prone 10,SAMP10)认知障碍的改善、脑组织炎症反应的抑制及其抗凋亡作用,为G-CSF治疗阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)的进一步研究提供依据。研究方法:1.随机将48只SAMP10分为两组,每组24只:rhG-CSF治疗组:rhG-CSF100μg/(kg·d),皮下注射;对照组:等体积生理盐水,皮下注射。给药时间均为7d。给药结束后第7天,14天,28天,56天时间点进行各种指标检测。2.认知功能测验:各组小鼠于给药前5天及处死前5天进行Morris水迷宫训练,实验历时5天,观察并记录其逃避潜伏期和目的象限游泳距离百分比。3.Morris水迷宫训练结束后心脏灌注处死小鼠,取脑,制作石蜡切片,进行免疫荧光染色,检测小鼠额叶脑组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的表达,采用Image-pro Plus图像分析软件,分析TNF-α、iNOS和caspase-3阳性细胞百分率、总面积及灰度值。4.采用SPSS13.0 for Windows软件包进行统计学处理,各组数据以(?)±s表示,差异显著性检验用方差分析和两样本t检验,P＜0.05为差异有统计学意义。结果:1.认知功能测验1.1定位航行实验结果对照组于第14天,28天,56天,逃避潜伏期较给药前明显延长(P＜0.05);rhG-CSF治疗组于不同时间点与给药前相比,差异无统计学意义(P＞0.05),第14天逃避潜伏期较对照组缩短(P＜0.05)。1.2空间探索实验结果对照组小鼠目的象限游泳距离百分比于给药后第28天,56天较给药前减少(P＜0.05);rhG-CSF治疗组目的象限游泳距离百分比于各个时间点之间差异无统计学意义(P＞0.05),在第14天,28天较对照组增加(P＜0.05)。2.免疫荧光染色法检测额叶TNF-α表达阳性反应物主要分布于大脑额叶皮质,为红色荧光标记,位于胞浆,细胞核不着色。细胞核用DAPI复染,为蓝色荧光标记。对照组治疗组于各时间点均可见额叶皮质TNF-α免疫阳性细胞表达,rhG-CSF治疗组于第14天、28天、56天TNF-α阳性细胞率,阳性细胞总面积及灰度值均明显小于对照组(P＜0.05)。3.免疫荧光染色法检测额叶iNOS的表达阳性反应物主要分布于大脑额叶皮质,为红色荧光标记,位于胞浆,细胞核不着色。细胞核用DAPI复染,为蓝色荧光标记。对照组治疗组于各时间点均可见额叶皮质iNOS免疫阳性细胞表达,iNOS阳性细胞率于治疗第14天、28天、56天明显少于对照组(P＜0.05),阳性细胞总面积于各时间点均小于对照组(P＜0.05)而灰度值于第14天与对照组差异无统计学意义(P＞0.05)。4.免疫荧光染色法检测额叶caspase-3表达阳性反应物主要分布于大脑额叶皮质,为红色荧光标记,位于胞浆亦可见于胞膜胞核。细胞核用DAPI复染,为蓝色荧光标记。对照组治疗组于各时间点均可见额叶caspase-3免疫阳性细胞表达,阳性细胞率于治疗第14天、28天明显少于对照组(P＜0.05),阳性细胞总面积于28天小于对照组(P＜0.05),灰度值于第28天与对照组有差异(P＜0.05)。结论:1.rhG-CSF能够改善SAMP10的认知障碍,延缓其学习记忆功能的衰退。2.rhG-CSF能减少SAMP10额叶皮质TNF-α和iNOS阳性细胞表达,抑制小鼠脑组织炎症反应。3.rhG-CSF可以减少SAMP10额叶皮质caspase-3阳性细胞的表达,具有抑制神经元凋亡的作用。