动脉粥样硬化痰证小型猪LXRa和LXRb表达的变化

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研究目的:动脉粥样硬化(AS)是一种慢性疾病,也是引发其他心脑血管疾病的最重要的因素之一。其主要病变特征是动脉某些部位的内膜下脂质沉积,并伴有平滑肌细胞及纤维成分的增生,逐渐发展形成局部的斑块。动脉壁也因而增厚、变硬,斑块组织内部坏死崩解与沉积的脂质结合,形成“粥样”物质的病理改变。因此脂类代谢和血液流变学的异常可以当作是动脉粥样硬化的重要标志。有其始动因素在于饮食失节,过食肥甘,致脾气亏虚,脾运失常,水谷难以化生精微。中医对AS的认识是逐步深入的,大部分学者均认为AS与“痰”有关。“痰”是人体水液代谢障碍所形成的病理产物。与AS密切相关的“痰”主要指祖国医学所说的“无形之痰”。 中医药在防治动脉粥样硬化方面具有潜在的优势和鲜明的特点,本研究造出动脉粥样硬化痰证的小型猪动物模型以期为中医微观辨证提供依据;运用分子生物学技术初步探讨肝X受体a(LXRa)和肝X受体b(LXRb)在动脉粥样硬化痰证发生、发展过程中的表达变化。 研究方法:由于小型猪在解剖学、生理学、营养代谢等方面与人类极为相似,疾病的发生发展和转归等方面更接近与人类。通过近交选育后的小型猪品种纯、遗传背景清楚,对实验耐受性强、反应均衡、实验重复性高。所以本次研究以五指山小型猪(WZSP)作为实验动物。采用损伤颈动脉加饲养高脂高胆固醇的方法制造动脉粥样硬化痰证的动物模型。共饲养五指山小型猪20头,随机分成三组,正常组4头,喂养基础饲料;实验组分为两组,一组饲养1.5%胆固醇,共8头,另外一组饲养3%的胆固醇,共8头。饲养周期为十二个月。每月测定猪体重。饲养4个月后,每两个月(即6、8、10月)抽血检测总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)。最后将所有小型猪杀死取其心脏,肝脏,脾脏,肺脏,肾脏及脂肪组织放-80℃保存以提取各组织RNA分析与胆固醇代谢相关两个基因LXRa和LXRb的组织表达差异。制备主动脉组织切片,主动脉取出后纵行切开,10%福尔马林固定,苏丹III染色,肉眼观察主动脉内膜硬化斑块,其中内膜表面粗糙,有大片苏丹III着色极深的为病变组织。而后石蜡包埋切片,HE染色,显微镜下观察。 结果:实验组与对照组比较,血浆TC、TG、LDL水平升高,HDL水平降低;实验组小型猪肝脏有大量的脂肪沉积,动脉有明显的脂质条纹及斑块;3%组较1.5%组病变明显。3%的胆固醇组动脉粥样硬化小型猪肝脏,脂肪组织中的LXRa和LXRb的mRNA表达均上调。 结论:本实验说明高脂高胆固醇饲料喂养小型猪可建立动脉粥样硬化痰证模型;动脉粥样硬化痰证小型猪肝脏,脂肪组织中的LXRa和LXRb的mRNA表达均上调。
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