谷氨酰胺通过ERS途径对新生大鼠高氧肺损伤的干预作用

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目的:探讨谷氨酰胺通过内质网应激(ERS)途径对高氧诱导下新生大鼠肺损伤的干预作用。方法:选择足月新生Wistar大鼠雌雄共90只随机分为:空气对照组(A组,n=30,FiO2=21%)、高氧组(B 组,n=30,FiO2>85%)和高氧+谷氨酰胺组(C 组,n=30,FiO2>85%)。C组从实验第1天始腹腔内注射GLN 0.75g/kg/d,A组和B组同剂量生理盐水腹腔注射。实验开始第3d、7d及14d测定新生大鼠体重;检测肺组织的湿/干比(W/D);HE染色观察肺组织病理改变;采用ELISA检测各组肺组织中IL-1β、IL-6和TNF-α的含量;利用羟安法测定SOD含量,采用TBA法检测MDA含量;利用westernblot法测定肺组织中Caspase-12、GADD153、GRP78和Bcl-2/Bax蛋白表达。结果:1.与A组比较,B组新生大鼠第3d、7d和14d体重明显降低(P<0.05);C组新生大鼠体重较B组明显增加(P<0.05)。2.B组新生大鼠第3d、7d和14的肺W/D值较A组升高(P<0.05),随高氧暴露时间的延长,其值差异更明显,C组新生大鼠肺W/D值较B组明显降低(P<0.05)。3.与A组比较,B组随着高氧暴露时间的延长肺组织结构病理改变较明显,如肺泡融合、纤维组织增生及间质炎性渗出等,C组上述病理改变较B组减轻。4.与A组比较,B组肺组织匀浆液中IL-1β,IL-6及TNF-α含量明显升高(P<0.05)。与B组比较,C组IL-1β,IL-6及TNF-α含量明显下降(P<0.05)。5.B组SOD活性随在高氧中时间延长降低,与A组比较,B组肺组织的SOD活性降低(P<0.05),第14d时差异最显著(P<0.05),C组SOD活性较B组明显升高(P<0.05)在高氧环境中随时间的延长,B组肺组织中MDA活性值逐渐增高,与A组相比,B组MDA活性明显升高(P<0.05),在14d时差异最大(P<0.05)。C组MDA活性值逐渐增高,但较B组降低(P<0.05)。6.B组第3、7和14天的Caspase-12、GADD153和GRP78蛋白的表达较A组明显升高(P<0.05),Bcl-2表达明显降低(P<0.05),而Bax蛋白表达略升高,但有统计学差异(P<0.05);C组的Caspase-12、GADD153、GRP78和Bax蛋白的表达较B组明显减少(P<0.05),而Bcl-2蛋白含量显著升高(P<0.05)。结论:1.GLN可减轻高氧诱导下的新生大鼠肺组织的水肿及炎症反应。2.GLN保护高氧肺损伤的作用机制可能与通过ERS途径下调Caspase-12、GADD153、GRP78和Bax蛋白表达及上调Bcl-2蛋白的表达相关。
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