该课题对亚硫酸氢钠穿心莲内酯原料药和注射用亚硫酸氢钠穿心莲内酯进行了研究.一、制备工艺;根据穿心莲内酯结构中△<12>与γ-内酯上的C=O构成的共轭双键具有能发生亲核加成的性质,将其与亚硫酸氢钠加成,制备亚硫酸氢钠穿心莲内酯.采用多次重结晶的方法来纯化亚硫酸氢钠穿心莲内酯.采用H1-NMR、C13-NMR、MS、HPLC对加成产物进行了结构验证和纯度检查,检测结果表明,此制备工艺制得的亚硫酸氢钠穿心莲内酯符合药典要求.注射用亚硫酸氢钠穿心莲内酯即将亚硫酸氢钠穿心莲内酯溶解,然后冷冻干燥而制成的一种冻干粉针剂.二、质量标准的制定;(一)、性状:白色或几乎白色的粉末.(二)、鉴别:参考部颁标准WS3-B-3668-98.(三)、含量测定:部颁标准WS3-B-3668-98采用分光光度法进行含量测定,存在较多弊端,该法采用了反相离子对高效液相色谱法(Ion-paired RP-HPLC)对亚硫酸氢钠穿心莲内酯进行含量测定,色谱条件为:Shim-pack VP-ODS色谱柱,4.6mm×15cm,5u;甲醇:0.09MKH<,2>PO<,4>水溶液(含四丁基溴化铵0.1g)(50:50),用1M氢氧化钠溶液调PH值至7.25,使用前以0.45μm滤膜过滤,超声波脱气;流速:1.0ml/min检测波长:215nm.精密度、重现性、线性、加样回收率以及强酸、强碱、沸水浴等方法专属性考察结果表明,采用该法测定亚硫酸氢钠穿心莲内酯准确、可靠、专属性强、简便易行.(四)、检查:根据中国药典2000版的一般要求及稳定性考察情况确定了检查项目为pH值检查、相关物质检查及其它.其中相关物质检查选用高效液相色谱法(同含量测定色谱条件).三、稳定性研究;根据新药审批办法的有关要求,分别采用了影响因素试验、加速稳定性试验和长期试验对稳定性进行了考察,研究结果表明原料药和冻干粉针剂(去除外包装)略具吸湿性,对光和热稳定性良好.四、药物动力学研究;亚硫酸氢钠穿心莲内酯易溶于水和甲醇,极性很大,很难用常规萃取法将其从体液中提取出来.尝试了用甲醇沉淀蛋白法,但沉淀效率很低;采用固相提取法成本高并且操作繁琐.采用离子对萃取后,回收率高并且操作简便,试剂也价廉易得,用HPLC进行血药浓度测定.通过3P97拟合,Beagle犬iv三个剂量的亚硫酸氢钠穿心莲内酯后的药物动力学过程均符合双室模型,分布及消除过程较快.