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该实验利用幼鼠毛果芸香碱惊厥持续状态模型,观察惊厥后脑组织的病理变化;并进一步探讨托吡酯、亚低温和两者联合干预对惊厥性脑损伤的保护作用.第一部分 幼鼠惊厥持续状态模型制备及病理改变 目的:观察幼鼠毛果芸香碱惊厥持续状态模型海马损伤情况.方法:复旦大学实验动物部提供全部实验动物n=139(生后18-21天Wistar雄性幼鼠、清洁级,体重45-50g),随机分为惊厥持续状态模型组(n=131)和正常对照组(n=8).幼鼠惊厥持续状态模型制备:腹腔注射毛果芸香碱150-180mg/Kg,观察幼鼠行为变化.腹腔注射同等剂量的生理盐水幼鼠作为对照观察;并进行脑电监测、病理HE染色、GFAP、caspase-3免疫组化和TUNEL检测;重点观察光镜下海马CA1、CA3区神经元和胶质细胞改变.第二部分 托吡酯对幼鼠惊厥持续状态脑损伤的神经保护目的:研究托吡酯对惊厥性脑损伤是否具有保护作用.方法:毛果芸香碱惊厥持续状态模型幼鼠随机分为托吡酯组(n=25)和对照组(n=24).托吡酯组为模型幼鼠惊厥后60min腹腔注射40mg/Kg托吡酯,每日一次,连续用药三天;对照组为惊厥后60min腹腔注射8ml/Kg生理盐水,每日一次,连续用药三天;检测海马区神经元坏死、凋亡、凋亡蛋白表达和胶质细胞增生变化情况.第三部分 亚低温对幼鼠惊厥持续状态脑损伤的神经保护目的:研究亚低温对惊厥性脑损伤是否具有保护作用.方法:毛果芸香碱惊厥持续状态动物模型随机分为亚低温组(n=18)和对照组(n=24).亚低温组为将模型鼠惊厥后60分钟放入低温箱内,每1小时监测箱内温度,使之维持于6~8℃持续72小时;并进行肛温监测,使之维持于33~35℃,至亚低温结束.对照组为在室温下,不给予干预.检测海马区神经元坏死、凋亡、凋亡蛋白表达和胶质细胞增生变化情况.结论:1.幼鼠毛果芸香碱惊厥持续状态动物模型可引起脑形态学上改变:海马锥体细胞坏死、凋亡,胶质细胞增生.2.托吡酯对惊厥性脑损伤具有不同程度的组织学保护作用:减少海马锥体细胞坏死、凋亡,缓解胶质细胞增生.3.亚低温对惊厥性脑损伤具有不同程度的组织学保护作用:减少海马锥体细胞坏死、凋亡,缓解胶质细胞增生.4.托吡酯和亚低温联合干预对于惊厥性脑损伤具有保护作用,可减少神经元坏死和凋亡;减少胶质细胞增生;抑制细胞凋亡途径.5.联合干预的确切疗效和机制需要进一步深入探讨.