论文部分内容阅读
目的:探讨ICP对围生儿的不良影响以及胎儿宫内缺氧的可能机制,探讨丹参活血化淤改善胎儿血供的可能机制。方法:临床收集ICP和正常妊娠各30例,采集外周静脉血,分离血清;比较新生儿体重、身长,胎盘重量,羊水粪染和Apgar评分情况。随机选取正常妊娠脐带,Jaffe法分离培养脐静脉内皮细胞,用ICP患者血清刺激培养的内皮细胞,模拟ICP的体内环境,行丹参干预,并与正常妊娠血清组比较,不同浓度作用不同的时间,MTT法检测细胞活力,ELISA法和免疫细胞化学法检测分泌型和膜结合型VEGF蛋白表达。结果:①ICP患者娩出的新生儿体重和胎盘重量明显低于正常妊娠组,羊水粪染率明显高于正常组,有统计学差异。②ICP患者血清与HUVECs共培养24h,MTT法发现浓度在(0、5、10、15、20%)范围内,随着浓度的增加OD值逐渐降低,以 20%浓度组OD值为最低;且OD值低于相应浓度的正常血清组,有统计学差异。③通过ELISA法发现:同正常孕妇血清组相比,ICP患者血清组HUVECs表达分泌型VEGF蛋白降低;分别刺激 12h、24h、36h,20%浓度组的VEGF蛋白表达均低于10%浓度组;24h、36h的VEGF蛋白量均低于相应浓度的12h组;20%ICP血清刺激24h,VEGF可降至最低。④与ICP血清组相比,丹参干预组随着浓度由1mg/ml增加到8mg/ml,吸光度值和VEGF蛋白表达逐渐升高,以8mg/ml组作用最佳,与正常孕妇血清组无差别。⑤应用免疫细胞化学方法:ICP患者血清刺激后HUVECs呈淡棕黄色着色,弱阳性,着色明显比正常孕妇血清组浅,丹参干预后,细胞着色变深,以8mg/ml组着色最深,呈强阳性,与正常孕妇血清刺激组HUVECs着色无统计学差异。结论:①ICP对围生儿产生不良影响。②ICP患者血清对HUVECs具有损伤作用,使细胞活力降低。丹参对内皮细胞具有保护作用。③ICP患者血清对内皮细胞的损伤,可能与VEGF的分泌减少有关。丹参能增加HUVECs VEGF蛋白的表达。④丹参可能通过增加VEGF蛋白的表达,具有活血化淤作用,改善胎盘和胎儿的血供而改善围生儿预后。