双歧杆菌和嗜酸乳杆菌是一类重要的益生菌,具有保持肠道菌群平衡、增强机体免疫力、防治胃肠道疾病等益生功能,因此,益生菌及其产品开发越来越成为研究的热点,但由于绝大多数益生菌不耐氧、不耐酸、易失活,且不同菌株之间还会出现拮抗现象,一定程度上限制了其开发应用与效能。为提高益生菌的活菌数和适应能力,本研究以青春双歧杆菌和嗜酸乳杆菌为试验菌株,开展了以下研究:1.青春双歧杆菌与嗜酸乳杆菌单独培养最适培养条件的研究(1)碳源的优化在不含碳源的MRS培养基中分别加入2%的菊粉、蔗糖、葡萄糖、乳糖和淀粉制成培养基。将两菌分别按1%的量接入制备的培养基中培养。结果,两菌都能利用菊粉、蔗糖、乳糖、葡萄糖,不能利用淀粉;在含菊粉的培养基中生长较好,而在含蔗糖、乳糖的培养基中生长存在延滞期。(2)氮源的优化采用四因素三水平正交试验设计,在不含氮源的MRS培养基中,分别按0.3%、0.6%、0.9%的量加入酵母膏(A),蛋白胨(B),大豆蛋白胨(C)和牛肉膏(D)制成培养基。将两菌分别按1%的量接入制备的培养基中培养。结果,影响因素呈现A>C>B>D。(3)益生元的优化在MRS培养基中分别加入1%的水苏糖、低聚果糖、低聚异麦芽糖制成含益生元的培养基,将两菌分别按1%的量接入制备的培养基中培养。结果,这3种低聚糖对青春双岐杆菌生长影响显著,而对嗜酸乳杆菌的影响不明显,尤其是低聚果糖对青春双岐杆菌生长的影响效果比水苏糖、低聚异麦芽糖较显著。2.青春双歧杆菌与嗜酸乳杆菌混合培养最适生长条件的研究通过单因素试验和RSA响应面分析法优化了两菌混合培养条件,探讨了两菌不同浓度配比、pH值、低聚果糖的不同添加量对混合培养生长的影响。结果,两菌浓度配比1:1、pH值6.512、低聚果糖的添加量1.499%时,两菌在混合培养体系中有良好的微生态关系。3.青春双歧杆菌与嗜酸乳杆菌活菌体收集得率的研究为确定两菌活菌体的最佳收集得率,采用离心时间、离心速率,做两因素三水平正交试验,结果,在4℃、6000r/min的条件下离心30min,活菌得率最高,为83.1%。4.青春双歧杆菌与嗜酸乳杆菌新产品的研制将青春双歧杆菌、嗜酸乳杆菌和益生元复配,采用不同方法制备合生元微胶囊、硬胶囊以及液态制剂;并对所制产品进行耐胃酸试验、肠道崩解试验和人工胃、肠液联合作用试验。结果,相同条件下,合生元微胶囊比合生元硬胶囊、合生元液态制剂存活率高。合生元微胶囊经人工胃液消化2h后存活率可达70.8%;在人工肠液经50min降解充分,溶出率达到96.7%;经人工胃液、肠液联合作用后存活率仍可达66.8%。