-80℃冰冻保存血小板的实验研究

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目的:明确血小板冰冻保存后功能指标的变化,了解低温对血小板的结构、功能和性质的影响,建立理想的冰冻保存条件和方法,优化低温冰冻保存血小板的技术,并为临床急需应用冰冻血小板的治疗及抢救提供理论依据和实验数据。 方法:采集健康人新鲜血进行离心,制作富含血小板的血浆(PRP),采用全自动血细胞分析仪检测并比较冰冻保存前后血小板数量PLT,PCT,MPV,P—LCR,PDW; PH试纸测PH值:相关功能检测,血小板聚集仪测聚集功能;流式细胞仪测CD62p(活化功能)将分离的血小板分别加入保护剂二甲基亚砜(5%DMSO)后迅速置于—80℃低温冰箱保存。血小板的采集到冰冻在6小时内完成,对保存到期的血小板进行复苏,复苏温度37—42℃,快速复苏,然后对Plt、MPV、PDW、PCT、P—LCR、PH值血小板CD62p表达、相关功能如聚集,活化功能(用血小板聚集仪测定血小板聚集功能、用流式细胞仪测定血小板的活化功能指标CD62p)进行检测,然后对冰冻前后指标进行配对资料t检验。 结果:血小板计数(Plt)、血小板平均体积(MPV)、血小板体积分布宽度(PDW)、血小板压积(PCT)、大血小板比例(P—LCR)、血小板PH值、血小板CD62p表达率、血小板聚集率(PAG)和聚集率单位时间的变化(Slope)冰冻前后对比均无统计学意义。 结论:血小板加终浓度为5%DMSO,在—80℃条件下冰冻保存一个月,血小板数量、形态、物理及化学性质等保持较好且较稳定,此技术条件可用于长期储备血小板资源,解决目前血小板供不应求的局面,很有希望广泛应用于临床。
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