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目的：研究S期激酶相关蛋白（S-Phase Kinase-Associated Protein2, Skp2）对人乳腺癌细胞株MCF-7和SKBR-3紫杉醇耐药诱导中（以下简称“MCF-7/PR”和“SKBR-3/PR”）上皮-间质转变的调控作用。方法：（1）以人乳腺癌细胞株MCF-7和SKBR-3为研究对象，利用紫杉醇（Paclitaxel）浓度梯度递增法构建乳腺癌耐药细胞株MCF-7/PR和SKBR-3/PR；（2）利用实时定量PCR技术和Western blotting技术检测乳腺癌耐药细胞株MCF-7/PR和SKBR-3/PR上皮-间质转变（epithelial-mesenchymal transition, EMT）相关指标Snail、Slug、E-cadherin、Vimentin和Skp2在分子水平和蛋白水平上的变化；（3）利用黏附分离实验（Attachment and detachment assay）、划痕实验（Wound-healing assay）、趋化实验（Transwell assay）等检测乳腺癌耐药细胞株MCF-7/PR和SKBR-3/PR相对于其亲本细胞株MCF-7和SKBR-3在生物活性上的改变；（4）利用流式细胞技术检测耐药细胞MCF-7/PR和SKBR-3/PR的周期变化；（5）利用蛋白印迹技术检测耐药细胞株中Skp2的底物P21、P27、P57、FOXO1的蛋白表达情况；（6）利用小干扰RNA技术干扰Skp2基因表达，通过EMT相关基因的检测，探讨Skp2干扰后是否能够逆转MCF-7/PR和SKBR-3/PR的EMT转变；（7）利用MTT法检测耐药细胞株Skp2干扰后的耐药株的增殖变化。结果：（1）成功构建了紫杉醇诱导的人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/PR和SKBR-3/PR；（2）实时定量PCR技术和Western blotting技术证实上皮细胞相关标志E-cadherin在耐药细胞株中明显低于亲本细胞株（P <0.05）；间质细胞相关标志如Snail、Slug、Vimentin和Skp2在耐药细胞株中明显高于亲本细胞株（P<0.05）；（2）黏附分离实验（Attachment and detachment assay）证明耐药细胞株黏附分离能力明显高于亲本细胞株（P <0.05）；趋化实验（Transwell assay）证明耐药细胞株穿膜的细胞数明显比亲本细胞株高（P <0.05）；划痕实验（Wound-healing assay）证明耐药细胞株的迁移能力比亲本细胞株明显增强（P<0.05）；（4）细胞周期分析结果表明耐药细胞株中S期细胞增多（P <0.05）；（5）蛋白印迹技术证实与亲本细胞株比较，耐药细胞株中Skp2的底物蛋白P21、P27、P57、FOXO1的表达均降低（P <0.05）；（6）小干扰RNA技术证实Skp2siRNA能够有效地干扰耐药细胞株中Skp2的表达，转染Skp2siRNA后耐药细胞展现出圆形细胞样形态；上皮细胞相关标志E-cadherin表达升高（P <0.05），同时Snail、Slug和Vimentin的表达降低（P <0.05）；黏附分离、迁移侵袭能力均降低（P<0.05）；（7）MTT结果证实Skp2干扰后耐药细胞株的增殖能力降低。结论：这些研究表明在紫杉醇诱导耐药的EMT改变中，Skp2发挥重要角色。耐药细胞中，Skp2的下调可部分逆转EMT表型。因此，Skp2可能是乳腺癌治疗的一个潜在靶点。