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wilson病(wilson disease,WD),是一种以铜代谢障碍为主要表现的常染色体隐性遗传病,由于铜在肝、脑、肾等组织沉积导致临床症状的发生.近年的研究将其致病基因确定为ATP7B,人ATP7B基因定位于13q14.3,长约80kb,含有21个外显子(exon)及20个内含子(intron),编码1411个氨基酸组成的铜转运P型-ATP酶(P-type ATPase,ATP7B),分子量约为155kDa.该蛋白是重金属转运P型ATP酶家族中的一员,具有高度的进化保守性,主要分布在肝脏.ATP7B的主要功能是将铜离子结合至前铜蓝蛋白形成铜蓝蛋白以及将体内多余的铜分泌入胆汁.由于WD基因发生突变,其编码的蛋白发生功能改变,铜转运能力部分或全部丧失,无法将多余的铜离子从细胞内转运出去,使铜离子在许多器官和组织沉积而致病.wD基因突变类型很多,其中较为确定的东方人的突变热点为Arg778Leu而西方人的突变热点为Hisl069Gln,均为错义突变.我们课题组在梁秀龄教授的带领下,自1988年即开始了对WD的分子生物学的研究.近十年来进行了基因突变、基因诊断及ATP7B蛋白的表达、结构和功能等方面的一系列研究.于1998年该课题组首次报道中国大陆的WD患者主要是第8号外显子发生Arg778Leu错义突变而发病,突变率为28.8％.于2003年引进WD动物模型tx小鼠,在国内首次开展胚胎肝细胞移植治疗的研究.结论 1.构建了小鼠白蛋白启动子引导下人ATP7B cDNA正常及常见突变体的转基因载体Kbpala/Alb-ATP7B.2.Kbpala/Alb-ATP7B可在肝细胞特异性表达,为转基因动物的制备打下基础.3.SYBR Green荧光定量PCR显示Kbpala/Alb-ATP7B转染BRL细胞后4小时即可检测到外源ATP7B cDNA的转录,48小时转录达高峰,可持续至转染后7天以上.4.空质粒的转染并不影响内源性CP基因的转录.5.外源ATP7B cDNA的转录及表达不影响内源性CP基因的转录水平.