论文部分内容阅读
目的：观察6-姜酚对急性T淋巴细胞白血病Molt4细胞增殖及凋亡等生物学特性的影响；观察6-姜酚与联合常规抗肿瘤药物对Molt4细胞及慢性粒细胞白血病K562细胞增殖的影响,探讨阐明其抗白血病机制,为从中草药提取的抗白血病药物的临床运用提供理论依据。方法：1.(1)MTT法检测6-姜酚对Molt4细胞的增殖抑制作用；(2)Hochest33258染色法用荧光显微镜观察Molt4细胞形态学的凋亡变化；(3)流式细胞仪检测6-姜酚对Molt4细胞周期的影响及早期凋亡率；(4)流式细胞仪检测6-姜酚对Molt4细胞活性氧自由基水平的影响；2.MTT法检测6-姜酚联合阿霉素及阿糖胞苷对Molt4及K562细胞的增殖抑制作用。结果：1.(1)6-姜酚作用于Molt4细胞48h、72h后,明显抑制Mlot4细胞增殖,48h、72h的IC50值分别是19.4±0.2μg/ml,15.7±0.1μg/ml,且具有时间、剂量依赖性；(2)6-姜酚作用Molt4细胞48小时后可见凋亡细胞；空白对照组和DMSO对照组的早期凋亡率分别为6.6%±0.2%、7.0%±0.4%；6-姜酚10μg/ml组、15μg/ml组的早期凋亡率分别是9.5%±0.3%、15.0%±0.3%,凋亡率明显高于对照组(p<0.05)。空白对照组、DMSO对照组G1期细胞所占比例分别为37.5%±0.2%、39.6%±0.1%,S期细胞所占比例为50.6%±0.1%、51.6%±0.2%,G2期细胞所占比例分别为11.7%±0.1%、8.7%±0.2%,6-姜酚20gμg/ml、25μg/ml处理组G1期所占细胞比例分别为4.1%±0.1%、5.8%±0.1%,S期细胞所占比例增加分别为85.1%±0.3%、87.1%±0.2%,显示姜酚作用于Molt4细胞的细胞周期S期(p<0.01)。(3)6-姜酚作用Molt4细胞2小时后,空白对照组和DMSO对照组的平均荧光强度(MFI)分别为1016±28、1025±31,姜酚15μg/ml和姜酚20μg/ml的MFI分别为1282±24、1242±22,显示6-姜酚作用白血病细胞后,MIF明显升高(p<0.05)。2.不同浓度6-姜酚(5μg/ml、10μg/ml)分别与不同浓度阿霉素(0.51μg/ml、1μg/ml、2μg/ml)及6-姜酚(5μg/ml)分别与阿糖胞苷(0.1μg/ml、0.2μg/ml、0.4μg/ml)联合用药作用Molt4细胞48h后可产生协同作用。结论：(1)6-姜酚对Molt4细胞有显著的增殖抑制作用,阻滞细胞于S期,其机理可能与诱导细胞凋亡、诱导细胞内活性氧自由基产生相关。(2)6-姜酚与阿霉素或阿糖胞苷联合作用Molt4细胞可产生协同作用。