目的:癫痫是一种常见的神经系统疾病。c AMP反应元件结合蛋白（c AMP response element binding protein,CREB）和苔藓纤维出芽（mossy fiber sprouting,MFS）可能在癫痫发病、发作、耐药性和认知功能障碍中具有重要作用。然而其参与癫痫病理过程的具体机制尚不明确。本研究旨在大鼠原代海马神经元和大鼠癫痫模型中探讨CREB对γ-氨基丁酸（gamma-Aminobutyric acid,GABA）A受体表达和癫痫发作的调控作用以及MFS与癫痫发作、耐药性以及认知功能障碍之间的相关性。方法:第一部分:构建CREB过表达慢病毒、CREB sh RNA干扰慢病毒和相应对照慢病毒。由SD乳鼠分离获得大鼠原代海马神经元。在10天的培养和Neu N抗体免疫荧光鉴定后,将原代海马神经元分为对照组、过表达组、过表达对照组、干扰组和干扰对照组。使用CREB过表达慢病毒、CREB干扰慢病毒和其对照慢病毒分别转染并改变相应组中原代海马神经元CREB表达水平。7天后使用Western blot检测并比较各组原代海马神经元（n=3）中CREB、p-CREB及GABAA受体α1、β2和γ2亚基蛋白水平。同时使用荧光定量PCR检测并比较各组原代海马神经元（n=3）中CREB及GABAA受体α1、β2和γ2亚基m RNA水平。第二部分:除10只作为正常对照外,使用剩余190只SD大鼠构建氯化锂-匹罗卡品癫痫模型。随后使用苯妥英钠和苯巴比妥进行耐药性筛选。根据耐药性筛选结果,将SD大鼠分为对照组、药敏过表达组、药敏过表达对照组、药敏干扰组、药敏干扰对照组、耐药过表达组、耐药过表达对照组、耐药干扰组和耐药干扰对照组（n=10）。将CREB过表达慢病毒、CREB干扰慢病毒和其对照慢病毒分别注射至相应组中大鼠双侧海马区域。视频监测各组大鼠转染前后癫痫发作频率和持续时间。使用脑深部电极记录右侧海马脑电图。使用Western blot检测各组大鼠（n=3）海马组织中CREB、p-CREB及GABAA受体α1、β2和γ2亚基蛋白水平。使用免疫组化检测各组大鼠（n=3）海马齿状回颗粒层CREB和GABAA受体α1亚基蛋白水平。使用Timm染色检测各组大鼠（n=4）海马齿状回MFS情况。统计分析各组间癫痫发作频率、发作持续时间、脑电频率、脑电波幅、蛋白表达水平和Timm评分是否存在差异。第三部分:除12只作为对照组外,38只SD大鼠被用于构建氯化锂-匹罗卡品癫痫模型。经苯妥英钠和苯巴比妥耐药性筛选分为药敏组（n=18）和耐药组（n=8）。视频监测各组大鼠癫痫发作频率。使用新物体识别试验和Morris水迷宫试验检测其认知功能障碍。使用Timm染色检测大鼠齿状回MFS水平。比较各组间癫痫发作频率、物体记忆、空间记忆和MFS水平的差异。使用Spearman秩相关性检验分析各因素间相关性。结果:第一部分:过表达组中原代海马神经元较过表达对照组CREB蛋白和m RNA水平以及p-CREB蛋白水平均明显增高,GABAA受体α1、β2和γ2亚基蛋白和m RNA水平均明显降低。干扰组原代海马神经元较干扰对照组原代海马神经元CREB蛋白和m RNA水平以及p-CREB蛋白水平均明显下降,而GABAA受体α1、β2和γ2亚基蛋白和m RNA水平均明显增高。第二部分:在药敏性和耐药性癫痫模型大鼠中,注射CREB过表达慢病毒后癫痫发作频率和持续时间均较注射前明显增高;注射CREB干扰慢病毒后癫痫发作频率和持续时间均较注射前明显降低;注射CREB过表达对照病毒和CREB干扰对照病毒前后癫痫发作频率和持续时间改变无统计学意义。药敏过表达组和耐药过表达组大鼠均较相应对照组大鼠具有更高的脑电频率和波幅、较高的海马CREB和p-CREB蛋白水平和较低的GABAA受体α1、β2和γ2亚基蛋白水平。药敏干扰组和耐药干扰组大鼠均较相应对照组大鼠具有较低的脑电频率和波幅,较低的海马CREB和p-CREB蛋白水平和较高的GABAA受体α1、β2和γ2亚基蛋白水平。第三部分:氯化锂-匹罗卡品癫痫模型大鼠较正常大鼠物体记忆和空间记忆学习能力均明显下降。耐药性癫痫大鼠较药敏性癫痫大鼠癫痫发作更为频繁,MFS更为明显,空间记忆学习能力障碍也更为严重。氯化锂-匹罗卡品癫痫模型大鼠的癫痫发作频率和空间记忆学习能力之间可能存在相关性。结论:改变大鼠海马神经元中CREB蛋白表达可能可以相应的改变p-CREB蛋白水平并负向调控GABAA受体α1、β2和γ2亚基表达和转录水平。过表达CREB蛋白可能增高氯化锂-匹罗卡品癫痫模型大鼠发作频率和强度,而干扰CREB蛋白表达可能降低其发作频率和强度。MFS可能与癫痫模型大鼠耐药性有关。癫痫发作频率、耐药性和空间记忆功能损害三者在癫痫模型大鼠中可能存在相关性。