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目的观察颊针对类风湿性关节炎家兔镇痛效应的时效特点,并以兔下丘脑中5-HT、NE含量为观测指标,初步揭示颊针镇痛的中枢机制,为颊针临床治疗疼痛提供理论依据。方法40只大耳白兔用Excel 2003软件随机分成A组正常组、B组模型组、C组体针组、D组颊针组,每组10只。将卵蛋白干粉按4mg/ml的浓度与弗氏完全佐剂(CFA)混匀,然后用电推剪推去兔背部和双膝关节的毛,将模型组、颊针组、体针组家兔在背部肩胛骨之间对称选择3对共6个注射点,每个注射点皮下注射该混悬液0.2ml,14天后以相同剂量在6个点再次进行皮下注射,一周左右后,在兔双膝关节内分别注入卵蛋白生理盐水溶液0.4ml,浓度为20mg/ml。一周后观察到注射后的兔进食量减少,活动减少,双侧膝关节肿胀,测定痛阈明显降低为造模成功。正常组不造模,但在相应部位、时间注射等剂量生理盐水。A组:于实验第27天开始,每天用与其它组相同方法固定30min。B组:于实验第27天开始,每天用与其它组相同方法固定30min。C组:于实验第27天开始,选双侧后肢“膝眼”和“足三里”,用华佗牌1寸30号毫针直刺0.3-0.5寸,每隔5min行针一次,采用捻转针法,频率100次/分钟,行针15秒,留针30分钟,每天治疗1次。D组:于实验第27天开始,选颊针“膝”穴治疗,用0.5寸30号毫针斜刺0.2-0.3寸,采用捻转针法,频率100次/分钟,行针15秒,留针30分钟,每天治疗1次。连续治疗10次,分别在治疗第1次、第10次针刺时测定针刺后0、5、15、30、60、120、240分钟各时间点痛阈值。用PL-200热刺痛仪采用高聚光灯产生可变强度的辐射光束,经过红外滤光镜聚焦照射兔耳部测痛点,以兔出现缩耳挣扎动作作为疼痛反应指标,自照射开始至兔出现反应的潜伏期时间(s)作为该兔的痛阈值。一般连测3次,取其平均值作为痛阈值。治疗10次后,将兔处死断头,置于冰盘中迅速取出全脑,准确分离下丘脑,用冰冷的生理盐水冲洗除去血液,用滤纸拭干,称重后放入离心管中置于冰浴的小烧杯中。用移液管量取体积9倍于脑组织重量的生理盐水加入离心管中用kimbol匀浆机制成浓度为10%的兔下丘脑组织匀浆,立即置入低温离心机3000r/min离心15min,吸取上清液加入离心管置-80℃冰箱保存备用。采用高效液相色谱荧光检测法测定下丘脑针刺痛阈曲线峰值点时5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)含量。结果(1)第一次针刺时颊针组、体针组镇痛效应均随时间变化(F=15.780,P=0.000),两组镇痛效应的时间变化趋势有明显差异(F=16.125,P=0.000)。(2)第10次针刺时颊针组、体针组镇痛效应均随时间变化(F=29.378,P=0.000),两组镇痛效应的时间变化趋势有明显差异(F=19.173,P=0.000)。(3)颊针组第1次与第10次针刺镇痛效应的时间变化趋势无统计学意义(F=0.973,P=0.486)。(4)体针组第1次与第10次针刺镇痛效应的时间变化趋势无统计学意义(F=2.750,P=0.064)。(5)经过针刺治疗之后,与模型组比较,颊针组和体针组下丘脑中5-HT含量均显著升高,有统计学意义(P<0.05)。颊针组和体针组下丘脑NE/5-HT值降低,有统计学意义(P<0.05)。结论(1)颊针镇痛效应具有明显的时间变化曲线,针刺5min时产生明显镇痛效应,30min时达到峰值,240min时降到最低值。(2)颊针组和体针组镇痛效应时效曲线具有相似性,又有明显差异,颊针表现为镇痛效应起效快、上升快,下降亦快;体针表现为镇痛效应起效慢、上升慢,下降亦慢。(3)颊针和体针对兔下丘脑中的5-HT和NE含量均有影响,可以使5-HT含量升高,使NE/5-HT比值降低,两组比较无统计学意义(P>0.05)。