青岛海域海洋真菌生物活性初探

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植物病虫害可造成农作物毁灭性危害,采用化学农药防治植物病害已成为国内外保证农作物高产稳产的重要措施。但是由于化学农药的大量使用,生态环境污染、食品安全隐患随之而来,最重要的是很多农业病虫害在长期的抗农药过程中形成了不同程度的耐药性与抗药性。因此,不仅对于山东这个农业大省、甚至全国或者全球来说,环境友好型的新型农药研发问题亟待解决。新资源海洋真菌代谢产物的研究对具有新颖结构和环境友好型农用抑菌活性物质的发现具有重要意义。本论文实验旨在从海洋生物中分离纯化并筛选出具有较好抑菌活性的海洋真菌菌株。  本论文实验的海洋生物样品均采集自青岛海域,根据菌株形态不同,使用组织分离法分离纯化出42株海洋内生真菌,其中海洋动物源真菌24株,海洋植物源真菌18株。选取不同来源的菌落形态特异的10株真菌菌株进行优化培养,并分别提取菌株的胞内和胞外次级代谢产物,浓缩成浸膏,便于进行海洋真菌生产力、产物丰富度以及生物活性筛选。  在生产力筛选过程中,发现四种培养基中以RICE培养基的生产力最大。在产物丰富度的TLC筛选过程中,发现同一菌株的同一培养基,培养液(胞外)与菌丝体(胞内)的代谢产物不同;同一菌株的不同培养基次级代谢产物差异性较大,说明外界条件的改变会影响海洋真菌的次级代谢过程。其中,海洋动物源菌株05-A的RICE培养基次级代谢产物丰富,海洋植物源菌株21-A的MH1培养基的发酵液中次级代谢产物丰富。  在生物活性筛选过程中,以四株病原细菌为指示菌株,采用滤纸片扩散法对于10株海洋真菌的次级代谢产物进行抗细菌活性测定,结果表明:海洋动物源真菌菌株02-A表现出抑菌广谱性,其中对大肠埃希式杆菌(E.C.)抑制效果最好,抑菌圈达到19mm(阳性对照为30mm);海洋植物源真菌菌株21-A抑菌作用具有专一性,对大肠埃希式杆菌(E.C.)有很强的抑制作用,最大抑菌圈可达23mm(阳性对照为30mm);十株供试样品均对大肠埃希式杆菌(E.C.)均有不同程度的抑制作用。同时,使用4株植物病原真菌作为指示菌株,采用平板对峙法对11株形态特异的海洋真菌进行了抑制作用的定性分析,结果发现:菌株12-A、21-A、24-A、26-A及27-A均表现出了较强的抑制作用,其中:菌株24-A可使指示菌MHKW、XMQS菌落变色;菌株26-A可使指示菌GJTJ、MHKW、XMQS菌落形态变异;菌株27-A抑制作用最强,使四株指示菌几乎不生长。
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