盾壳霉(Coniothyrium minitans)是一种能寄生核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)菌丝和菌核的重寄生真菌,可用于菌核病的生物防治。盾壳霉菌株ZS-1的T-DNA插入突变体库在前期研究中已构建,本研究以其中一个产黑色素缺陷型突变体ZS-1TN24363为材料进行了深入研究,主要结果如下:1.通过hiTAIL-PCR克隆到了T-DNA插入位点处的侧翼序列,比对分析发现T-DNA插入破坏了一个可能的基因。该基因全长3167 bp,预测含有3个外显子,2个内含子,编码一个含1011个氨基酸的蛋白。该蛋白N端含有一个Zn-clus和Med3的保守结构域,C端含有一个fungal-TF-MHR的保守结构域。进化树分析发现该蛋白与Clohesyomyces aquaticus的转录因子Cmr1蛋白相似性最高,故将该基因命名为CmMR1。2.利用基因敲除技术获得了3个CmMR1基因敲除转化子。敲除转化子和突变体ZS-1TN24363的菌落形态相似,菌落显橙色无黑色素沉积,可产生无色透明的分生孢子器和分生孢子。CmMR1基因互补可使敲除转化子恢复产黑色素表型。基因CmMR1对菌株的生长速率、产孢量、生物学产量、寄生核盘菌菌丝菌和核的能力、对高渗的耐受性等均无明显影响,但CmMR1的敲除使菌丝中ROS含量增多,抗紫外线能力减弱。3.基因CmMR1的敲除使黑色素合成酶基因Cm4HNR、CmSCD、Cm3HNR、CmLAC的表达量下调,证明CmMR1参与调控这些黑色素合成酶基因的表达。上述结果表明,基因CmMR1不影响盾壳霉的生长、产孢和寄生,但是与黑色素的生物合成有关。