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犬瘟热（Canine distemper,CD）是由犬瘟热病毒（Canine distemper virus,CDV）引起的一种多种属动物共患传染病,因其引起感染动物发病率高和死亡率高被人们所重视。CD临床症状多样,可以引起发热、结膜炎、神经系统症状等,病程中后期可因细菌引起继发感染。传统宿主包括犬科、鼬科、浣熊科和猫科等。近年来,CD在世界范围内暴发,特别是CD的跨宿主传播引起了人们的重视。作为CDV受体识别蛋白的H蛋白是病毒变异最频繁的蛋白,H蛋白变异导致的抗原漂移可能是CD高发的原因。研究显示,CDV H基因的变异导致病毒适应了新宿主猕猴,有可能突破宿主屏障通过SLAM受体传播给人类,这可能对当今人类公共卫生安全构成威胁。本研究通过表达绿色荧光蛋白（eGFP）的重组CDV 5804Pe株在表达人SLAM受体的Vero细胞（Vero-hSLAM,VHS）上连续传代,最终获得能快速适应人SLAM受体的毒株。病毒H基因测序表明,CDV适应人SLAM受体H基因第540位氨基酸发生改变,即由天冬氨酸（D）突变为甘氨酸（G）。通过构建突变体的真核表达载体和细胞融合试验证实,仅需一个氨基酸的改变就可以使CDV适应人SLAM。本研究通过对适应人SLAM受体的CDV 5804Pe毒株（5804Pe-VHS）进行全基因组测序,发现共有3处氨基酸位点发生突变。CDV不仅有感染新宿主的风险,对传统宿主的免疫防控也提出了新的挑战。CDV是犬的主要病原体,对自然犬群的致死率高达80%,幼龄犬最易感染。目前,接种疫苗被认为是预防犬瘟热最安全有效的方法。传统犬瘟热活疫苗研制于上世纪50-60年代,对全世界犬瘟热的防控作出了巨大贡献。然而部分犬瘟热活疫苗对野生动物（大熊猫、小熊猫、雪貂等）和幼犬仍然具有残余毒力,疫苗安全性不高。其次,伴随当前CDV的频繁变异,传统活疫苗对动物的免疫保护效果也提出质疑。因此,有必要通过研制新型安全高效疫苗（包括弱毒疫苗）,以保持犬瘟热疫苗良好的免疫保护效果。免疫佐剂是灭活疫苗的重要组成部分,能够提高灭活疫苗的免疫原性,并诱导宿主产生长期高水平的免疫应答,增强免疫效果,因此犬瘟热灭活疫苗是当前研究热点之一。本研究将CDV野毒株(106.0TCID50/mL)经β-丙内酯灭活后,通过添加不同疫苗佐剂制备成灭活疫苗,对幼龄比格犬进行3次免疫,免疫后的比格犬使用CDV强毒株攻毒,通过中和抗体测定、临床症状观察、采集口鼻和直肠拭子和组织脏器检测病毒载量等综合评估MONTANIDE GEL 02、ADJ-801和Al（OH）3三种佐剂制作的灭活疫苗的免疫效果。结果证实发现MONTANIDE GEL 02和ADJ-801佐剂制成的灭活疫苗能够显著增强CDV疫苗在比格犬体内的免疫应答,第三次免疫后中和抗体滴度分别为10.6和40.2,攻毒第14天中和抗体滴度均达512,保护率分别为80%和100%,具有良好的免疫效果,试验为CDV的防控提供了研究素材。