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酮病是围产期奶牛高发的营养代谢性疾病。其导致的死亡率虽然不高,但诱发脂肪肝、子宫炎、胎衣不下等疾病,而且会导致奶牛的泌乳量和乳质量降低,增加奶牛的淘汰率和治疗成本,严重威胁奶牛的健康和牧场的经济效益。患酮病的奶牛,肝脏会受到不同程度的损伤,导致肝功能异常。甘草酸单铵盐具有抗炎、抗氧化、保护肝脏等功效。本研究通过监测围产期奶牛生产性能和血清生化指标的变化,确定亚临床酮病的临床特征,并探讨了甘草酸单铵盐对奶牛肝细胞脂肪变性的作用及对酮病的预防效果,为临床应用提供理论依据。一、亚临床酮病对围产期奶牛生产性能和血清生化指标的影响选择40头体况、胎次相近的围产期健康荷斯坦奶牛,分别采集产前21、14、7 d和产后1、3、5、7、14、21 d的尾静脉血。按照血清BHBA水平的高低将奶牛分为亚临床酮病（SCK）组和健康对照组,比较两组奶牛在生产性能和血清相关指标的变化。结果表明,产后8周内,两组奶牛泌乳量无显著差异（P>0.05）,但SCK组乳中的乳脂率显著高于对照组（P<0.05）。SCK组体细胞数和尿素氮的含量虽然高于对照组但差异不显著,且乳蛋白率低于对照组（P>0.05）。产后1～3周SCK组奶牛体况评分低于对照组（P>0.05）。两组奶牛血清BHBA、NEFA含量在产前一周均升高,但SCK组奶牛产后显著高于对照组,而血清GLU的水平低于对照组（P<0.05）。SCK奶牛血清肝功能、肾功能、代谢激素、抗氧化、炎症等相关指标有一定变化,但与对照组均差异不显著（P>0.05）。表明产后三周是奶牛亚临床酮病的高发期,血清BHBA、NEFA含量可作为诊断亚临床酮病的依据,亚临床酮病影响乳汁中的体细胞数和乳蛋白含量。二、甘草酸单铵盐对体外奶牛肝细胞脂肪变性的保护作用分离原代犊牛肝细胞,根据处理不同将细胞分为对照组（不做任何处理）、模型组（用0.25 mmol/L油酸钠诱导建立体外奶牛肝细胞脂肪变性模型）、MAG组（在油酸钠诱导之前使用0.1、0.25、0.5、1、5 mmol/L的甘草酸单铵盐预处理肝细胞12 h作为预保护）。结果显示,与对照组相比,油酸钠诱导培养可以使肝细胞内蓄积大量的脂滴,细胞的活性降低、凋亡率增加且细胞培养上清ALT、AST活性显著升高（P<0.05）;模型组细胞氧化指标MDA、LDH的水平显著高于对照组（P<0.05）,抗氧化指标GSH和CAT显著低于对照组（P<0.05）;模型组脂合成基因SREBP-1c的表达水平,脂转运和代谢基因PPARα、MTP、CPT1、CPT2的转录水平均显著高于对照组（P<0.05）;模型组炎症相关基因TLR4、MyD88、TNF-α、IL-1β、NF-κB、IL-6基因的转录水平显著高于对照组（P<0.05）,其中TLR4、NF-κB、IL-6的蛋白表达水平显著高于对照组（P<0.05）;模型组凋亡相关基因Cyt-c、caspase9、caspase8、caspase3、Bax基因转录和蛋白表达水平均显著高于对照组（P<0.05）,Bcl-2的转录和蛋白表达水平均显著低于对照组（P<0.05）。与模型相比,MAG预处理细胞可以提高肝细胞的活性,减少细胞内的脂肪蓄积,显著降低培养上清ALT、AST活性（P<0.05）。MAG组细胞氧化指标MDA、LDH的水平显著低于模型组（P<0.05）,GSH、CAT显著高于模型组（P<0.05）;MAG组脂合成基因SREBP-1c的转录水平显著低于模型组（P<0.05）,ChREBP的转录水平差异不显著（P>0.05）,脂转运和代谢基因PPARα、MTP、CPT1、CPT2基因的转录水平显著高于模型组（P<0.05）;MAG组炎症相关基因TLR4、MyD88、TNF-α、IL-1β、NF-κB、IL-6转录水平显著均低于模型组（P<0.05）,其中TLR4、NF-κB、IL-6的蛋白表达水平均显著低于模型组（P<0.05）;MAG组凋亡相关基因Cyt-c、caspase9、caspase8、caspase3、Bax基因转录和蛋白表达水平均显著低于模型组（P<0.05）,Bcl-2的转录和蛋白表达水平均显著高于模型组（P<0.05）。结果表明MAG预处理可以提高肝细胞的抗氧化能力,并通过TLR4/MyD88/NF-κB通路抑制炎症因子的表达,减轻细胞炎症反应,提高细胞活性,促进肝细胞内脂质代谢,减少细胞内脂肪沉积。三、甘草酸单铵盐对围产期奶牛生产性能和血清生化指标的影响选择体况和胎次相近的围产期荷斯坦奶牛45头,分为三组,对照组、MAG3g组、MAG 6g组,MAG添加在日粮中饲喂,试验周期为奶牛产前21 d至奶牛产后21 d。分别采集奶牛产前21、14、7d和产后1、3、5、7、14、21 d尾静脉血液样品,检测血清生化指标;记录试验期间不同组奶牛体况评分变化、常见营养代谢性疾病的发病率,统计奶牛产后第60 d泌乳量和乳成分的变化。结果表明,与对照组相比,MAG对围产期奶牛体况和泌乳量无明显影响（P>0.05）,但MAG3 g组可以显著提高乳脂和乳蛋白的含量（P<0.05）,MAG组奶牛产后常见疾病的发病率低于对照组。与对照组比较,MAG组奶牛产后血清NEFA、LDL-C含量显著降低（P<0.05）,血清葡萄糖含量显著提高（P<0.05）,血清GC、LEP、INS含量差异不显著（P>0.05）;MAG组奶牛血清ALT、AST活性降低,血清TP、GLB含量升高（P<0.05）,血清肾功能相关指标变化不显著（P>0.05）;MAG 3 g组可以显著提高奶牛产前血清Ca的水平（P<0.05）,MAG 6 g组显著提高奶牛产后血清P的水平（P<0.05）;MAG可降低围产期奶牛血清MDA、NO含量,提高血清GSH-Px、SOD、CAT、T-AOC活性（P<0.05）;MAG可降低围产期奶牛血清IL-1、IL-12、IL-6的水平,提高IL-2的水平,但对血清IgG、IgM、IgA含量无显著影响（P>0.05）,但是3 g MAG组IgG的水平显著低于6g组（P<0.05）。表明围产期奶牛日粮中添加MAG,能够提高奶牛的生产性能,降低血清脂肪代谢相关指标的水平,提高抗氧化能力,改善机体的代谢状况,从而降低产后疾病的发病率。