论文部分内容阅读
本实验室以前发现分离自花生的茄青枯假单胞菌菌株T2005(生理小种1)的一段4.5 kb DNA(pGX1404)能使在花生上不致病的分离自马铃薯的菌株T2014(生理小种3)在花生上致病。本工作发现，只含有pGX1404上ORF3的亚克隆pGX6418仍能象pGX1404一样能使T2014在花生上致病。从而证实了ORF3是花生寄主特异性毒性基因(hsvP，host specific virulence to peanut)。 我们采用互补和hsvP基因同属一个操纵元的其下游基因ORF2的方法构建了T2015的只有hsvP基因突变的突变体T2135／R。T2015、T2014、T6418、T2135／R等菌株对花生等不同作物的植株致病性试验和烟草上过敏反应试验表明hsvP基因除与病菌在花生上致病有关外，还与病菌在马铃薯等作物上致病有关，而与病菌在非寄主植物上引起过敏反应无关。T6418的菌落形态明显大于T2014，而T2135／R的菌落与T2015相比则显著变小，这暗示了hsvP基因与菌落大小有关。hsvP基因序列分析表明它编码的产物与大肠杆菌的rfaL基因的产物脂质A核心区—O—抗原连接酶有23％一致性和44％相似性。病菌的LPS电泳检测表明T2135／R的LPS缺少O—抗原，证实hsvP基因在LPS合成中起脂质A核心区—O—抗原连接酶作用。尽管T2015／R仍保留一定的毒力，但和T2015相比，其在花生植株体内的数量显著减少，而丁6418的数量显著多于T2014的数量。这可能说明在植株体内完整的LPS能够更好地保护病菌免受植物的抗菌物质的伤害，或者完整的LPS作为信号分子能够部分抑制植物的防御反应。 对T2014的和T201 5 hsVP基因同源的序歹IJ的测序分析表明，T2014的同源基因和T2o15的hsvp基因相比在1 033一1 o36bP处缺少4个碱基，产生一个编码框内的终止密码子(in一frame stop codon)使翻译提前终止。LPS电泳检测表明带有T2015 hsVP基因的T2014的LPS带型发生明显改变。这也进一步证实hsvP基因编码的产物在LPs生物合成中起脂质A核心区一0一抗原连接酶作用。