雷公藤红素对NETs相关因子的剂量效应及一种新吞噬功能检测法初探

来源 :福建中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cenkk
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:  观察雷公藤红素对人中性粒细胞mTOR mRNA的表达及组蛋白H3释放的影响,并探讨、分析两者间关系,探讨雷公藤红素对中性粒细胞组蛋白H3释放可能存在的剂量效应,及其对中性粒细胞抗感染功能影响,进而为雷公藤在临床运用上提供基础实验结果和理论依据。建立一种新的评价中性粒细胞吞噬功能的流式细胞仪-石墨烯量子点方法,经过优化将其初步运用于评价健康人和肿瘤化疗后患者中性粒细胞吞噬功能。  方法:  1.雷公藤红素对中性粒细胞mTOR表达及组蛋白H3释放的影响  分离健康人外周血中性粒细胞,短暂培养。雷公藤红素分别按低剂量、中剂量、高剂量三组各干预中性粒细胞1h、1.5h、2h,运用Real-time PCR检测mTOR mRNA表达,同时平行采用激光共聚焦荧光显微镜检测中性粒细胞组蛋白H3的释放情况,并分析两者间关系。  2.一种新型荧光材料GQDs评价中性粒细胞吞噬功能的流式细胞术方法初探  应用透射电子显微镜观察中性粒细胞吞噬石墨烯量子点情况,进而采用激光共聚焦荧光显微镜观察被吞入中性粒细胞内的石墨烯量子点的荧光特性。对实验条件进行优化,同时使用QuantiBRITE PE标准微球对石墨烯量子点荧光强度进行标准化处理,建立一种新的评价中性粒细胞吞噬功能的流式细胞仪-氧化石墨烯量子点方法;并将此法用于评价健康成人和肿瘤化疗后患者中性粒细胞的吞噬功能,初步验证其可行性。  结果:  1.雷公藤红素对中性粒细胞mTOR mRNA表达的剂量效应  实验研究结果显示,雷公藤红素在低浓度短时间内可诱导mTOR mRNA表达增加,但随着干预浓度及时间的延长,mTOR mRNA的表达受到显著的抑制。  2.雷公藤红素对佛波酯刺激中性粒细胞释放组蛋白H3的剂量效应  低浓度雷公藤红素在短时间内能够抑制佛波酯刺激中性粒细胞释放组蛋白H3,高浓度能促进佛波酯刺激中性粒细胞释放组蛋白H3。雷公藤干预中性粒细胞1小时后,在佛波酯的刺激下,高浓度组(4.0μM)比对照组(0.0μM)能够释放更多量的组蛋白H3,而低浓度(1.0μM)干预1小时时,在佛波酯的刺激下未能释放组蛋白H3。  3.透射电子显微镜观察显示石墨烯量子点被大量吞入中性粒细胞胞内,在中性粒细胞的吞噬囊泡和伪足内可见密集的石墨烯量子点,与空白对照比较,无非特异性吸附。  4.激光共聚焦荧光显微镜观察显示被吞入中性粒细胞胞内的石墨烯量子点在同一激发光激发下发射不同波长荧光,当发射波长为408nm呈现明显蓝色,发射波长为488nm呈现明显绿色。  5.初步建立一种新的评价中性粒细胞吞噬功能的流式细胞仪-石墨烯量子点方法  初步确定实验优化条件:200μl的全血,加入10μl脂多糖(LPS100ng/ml),12μlGQDs,37℃水浴反应30min。使用QuantiBRITE PE标准微球对石墨烯量子点荧光强度进行标准化处理;并将本方法用于评价健康成人和肿瘤化疗后患者中性粒细胞的吞噬功能,结果显示该法能明显区分化疗组患者和健康组的中性粒细胞吞噬功能(P<0.05)。  结论:  1.雷公藤红素对人中性粒细胞mTOR mRNA表达和组蛋白H3释放呈现剂量效应。  2.初步建立了评价中性粒细胞吞噬功能的流式细胞仪-石墨烯量子点方法。
其他文献
我的家人称我为食肉动物,糖醋里脊、红烧肉都是我所爱,但我最喜欢的,要数土豆炖牛肉。  如果哪天奶奶做了土豆炖牛肉这道菜,不用端上桌,我就能闻得出来。等到吃饭时,我就一个箭步蹿过去。瞧!牛肉在酱汁的浸泡下看起来那么饱满,每一条纹理都很清晰;经过长时间慢炖的土豆,散发着金黄色的光泽。我们经常用“色香味俱全”来形容美食,虽然土豆的土黄色和牛肉的棕褐色配在一起不那么好看,但是它们的味道真是绝配!  我夹起
期刊
期刊
目的:观察仙灵骨葆胶囊联合达英-35对多囊卵巢综合征骨量减少的影响以及对肾虚血瘀证候的改善,提高多囊卵巢综合征患者的生活质量。  方法:选取多囊卵巢综合征患者,临床诊断
看广告也能赚钱?这是狂人马昭德的又一个创业项目。他打破了传统广告“商家花大钱投放没效果,用户看着嫌烦”的尴尬困境,一年就进账20亿元。近日,他还放出“跨界打劫”的豪言,宣布要从近万亿广告市场大蛋糕中,不客气地切走1000个亿,构造“指尖上的广告帝国”。  超前,卖茶叶的冲云端落低谷  马昭德1972年出生于重庆一个工人家庭,大学毕业后在好几家公司打拼。他看过关于比尔·盖茨的很多书,对创业有着火一样
研究目的众所周知,脑缺血再灌注后会造成脑部特定区域的神经细胞损伤,然而这种损伤机制尚不清楚。前期我们课题组的实验研究表明,左旋樟脑能够保护脑缺血再灌注损伤,然而,对