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β-受体阻断剂(β-blockers)是一类能选择性与β-肾上腺素受体结合,从而拮抗神经递质对β-肾上腺素受体激动作用的药物。因具有一定的镇静作用,在畜牧业养殖中常被非法用于促生长或抗应激,从而导致在动物可食性组织中残留,对人体健康造成威胁。基于此,本研究拟建立牛和猪可食性组织及牛奶中卡拉洛尔、醋丁洛尔、阿替洛尔、倍他洛尔、拉贝洛尔、美托洛尔、纳多洛尔、喷布洛尔、普萘洛尔共9种β-受体阻断剂的残留检测方法,不仅为今后该类药物的残留监控提供技术手段,而且对提高动物性食品质量,保障消费者健康具有现实意义。1.建立牛和猪可食性组织中β-受体阻断剂多组分残留的HPLC-MS/MS检测方法样品前处理及净化:组织样品匀浆后冷冻,再复融,用β-葡萄糖醛苷酸酶/芳基硫酸酯酶水解,乙腈提取,之后用基质分散固相萃取技术(MSPD)对提取液进行净化。HPLC-MS/MS检测条件:以0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈水溶液为流动相,梯度洗脱;利用 Waters ACQUITY UPLC(?)HSS T3(100mm×2.1mm,1.8um)色谱柱进行分离;采用ESI源正离子模式电离,MRM模式进行扫描,内标法定量。检测方法确证:9种β-受体阻断剂在0.5～50μg/L范围内线性关系良好,相关系数(r)均大于0.99。以空白牛和猪组织样品进行加标试验,加标水平为2.5μg/kg、5μg/kg、25μg/kg时,牛肝组织中各样品平均回收率在87.6%～112.2%之间,日内和日间的相对标准偏差(RSD)在2.0%～12.2%和5.6%～15.1%之间;牛肌肉组织中各样品平均回收率在86.7%～104.6%之间,日内和日间的相对标准偏差(RSD)在2.2%～12.2%和8.5%～13.0%之间;牛肾组织中各样品平均回收率在85.4%～108.5%之间,日内和日间的相对标准偏差(RSD)在3.6%～12.6%和6.0%～15.8%之间;猪肝组织中各样品平均回收率在84.4%～114.2%之间,日内和日间的相对标准偏差(RSD)在2.0%～12.6%和4.8%～18.7%之间;猪肌肉组织中各样品平均回收率在84.9%～100.2%之间,日内和日间的相对标准偏差(RSD)在2.0%～11.5%和2.9%～15.5%之间;猪肾组织中各样品平均回收率在87.1%～114.2%之间,日内和日间的相对标准偏差(RSD)在3.0%～14.6%和4.2%～15.0%之间。本研究中9种β-受体阻断剂在牛和猪可食性组织中的检测限和定量限分别为1μg/kg和2.5μg/kg。2.建立牛奶中β-受体阻断剂多组分残留的HPLC-MS/MS检测方法样品前处理及净化:牛奶样品冷冻后再复融,利用2ml 15%三氯乙酸和4ml乙腈水解提取,MCX柱净化。HPLC-MS/MS检测条件:同上述可食性组织样品的检测条件。检测方法确证:9种β-受体阻断剂在0.5～50μg/L范围内线性关系良好,相关系数(r)均大于0.99。以空白牛奶进行加标试验,加标水平为0.5μg/kg、μg/kg、5μg/kg时,牛奶中平均回收率介于87.6%～112.2%之间,5μg/kg浓度的加标水平下日内和日间的相对标准偏差(RSD)在2.0%～12.2%和5.6%～15.1%之间。本试验牛奶中9种β-受体阻断剂的检测限为0.2μg/kg,而定量限为0.5μg/kg。综上所述,本研究建立的检测方法中,牛和猪组织、牛奶中9种β-受体阻断剂在3种不同浓度的加标水平下,回收率均大于85%,加标水平下的日内与高浓度加标水平下的日间相对标准偏差均小于20%。检测限和定量限满足目前欧盟等国规定的动物可食性组织中最高残留限量要求。因此该检测方法适用于牛和猪可食性组织、牛奶中的β-受体阻断剂多残留检测。