基于传粉过程和瓣化机制对大花黄牡丹的引种研究

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大花黄牡丹(Paeoni ludlowii)是国家二级保护植物,同时兼具观赏价值、药用价值,是极为珍贵的植物资源和育种材料。为了充分利用大花黄牡丹的资源价值,项目组将生长于海拔约3000m的西藏自治区林芝市巴宜区米瑞乡米瑞村的大花黄牡丹进行引种到海拔约3800m的拉萨市区,发现大花黄牡丹在拉萨能够正常开花,并出现了重瓣植株。本实验围绕大花黄牡丹的观赏特征,以原生地和引种地两个的大花黄牡丹植株群体进行比较,从传粉生物学特征、繁育系统和瓣化机制方面进行了研究,为大花黄牡丹在高海拔地区的引种繁育奠定理论基础。以下是主要研究结果。1.大花黄牡丹传粉生物学特征(1)大花黄牡丹生物学特征大花黄牡丹植株高大,叶片为二回三出羽状复叶,叶片深裂,两面无毛,花为聚伞花序,花瓣、花丝和花药均为黄色,一般为单瓣花,引种后出现重瓣植株。雄蕊在花苞打开之前开裂,开放过程中花药从内轮向外逐步开裂。种子较大,暗褐色,呈不规则扁圆形。(2)开花物候原生种群群体花期为四月下旬至五月下旬,单花花期4-9天,平均6天,该种群平均花期同步指数为0.57。引种种群群体花期为五月下旬至六月上旬,单花花期3-5天,平均4天,该种群平均花期同步指数为0.73。引种地大花黄牡丹相较于原生地,开花时间推迟约一个月,群体花期和单花花期均缩短,表现出更为集中的开花模式。(3)花粉活力和柱头可授性原生种群大花黄牡丹开花第一天花粉活力最高,此后逐渐降低,花粉活性较强与柱头可授性强的的重叠时间为2d。引种种群大花黄牡丹开花第一天花粉活力最高,此后逐渐降低,花粉活性较强与柱头可授性强的时间几乎不重叠。2、大花黄牡丹繁育系统原生种群与引种种群杂交指数(OCI值)均为4,大花黄牡丹繁育系统为异交,部分自交亲和,需要传粉者。原生种群和引种种群花粉胚珠比(P/O值)分别为49637和21196,按照标准,其繁育类型为专性异交。根据结籽率,自交亲和。3、大花黄牡丹瓣化机制探讨许多研究表明AGAMOUS(AG)基因在花器官分化和开花决定方面起着重要的调节作用,本实验通过分离和检测重瓣大花黄牡丹的AG基因,探究大花黄牡丹的瓣化机制,利用同源克隆基因的方法,以大花黄牡丹突变系和保持系的早期花蕾总RNA为研究对象,分别克隆AG基因,然后利用生物信息学方法对这个基因的核苷酸和蛋白氨基酸序列结构和组成进行信息学分析。结果显示AG基因的DNA全长为726,编码241个氨基酸,且在突变系和保持系中序列一致。生物信息学分析结果表明在大花黄牡丹中克隆得到的AG基因属于典型MADS-box基因家族的Ⅱ类MIKC型基因,属于C类基因。基因序列的变化不是大花黄牡丹产生重瓣的原因,推测在大花黄牡丹中,基因的表达量变化可能与大花黄牡丹瓣化性状密切相关。
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