桑黄功效作用研究及在规模化人工栽培中的应用

来源 :浙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:atang2010
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目的:通过桑黄抗炎、免疫实验筛选其功效作用活性部位,并对其活性部位成分分析,以客观评价其功效。通过建立一套桑黄栽培用质量控制体系,应用于人工栽培体系,建立规范化栽培流程,为桑黄资源保护、成分及抗肿瘤临床应用提供客观依据。方法:通过桑黄水煎液对小鼠耳片肿胀的改善作用,对小鼠毛细血管通透性的影响,对小鼠S180实体瘤的抑制作用,ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验,血清溶血素检测,小鼠碳廓清试验以及桑黄醇提部位体外抗A549活性筛选试验,并采用液质联用法对醇提部位进行成分分析。以紫外分光光度法测定桑黄中总黄酮、总三萜、总多酚、总黄酮的含量;以高效液相色谱法测定桑黄中Inoscavin A及 Hypholomine B 的含量。结果:桑黄水煎液对二甲苯引起的小鼠耳片肿胀、毛细血管通透性有一定的抑制作用,但与空白对照组比较无显著性差异(P>0.05);桑黄水煎液对S180荷瘤小鼠的肿瘤抑制作用优于人参,但尚未达到统计学差异,且与模型对照组比,差异无统计学意义,说明桑黄水煎液以及人参水煎液对S180肉瘤的直接抑瘤作用均未达到治疗水平;对小鼠免疫功能结果显示,桑黄水煎液对S180荷瘤小鼠T淋转、溶血素水平无明显影响;桑黄水煎液对正常小鼠碳廓清水平无明显影响;桑黄醇提部位对A549细胞株有较好的抑制增殖作用,并呈现良好的剂量-效应关系,其在12.5μg/mL~200μg/mL对A549细胞株的抑制率为31.0%~99.3%。本研究还通过对供试品溶液制备方法、色谱条件、质谱条件的优化,建立了桑黄醇提物体外化学成分分析方法。建立了桑黄质量控制体系,主要包括鉴别、醇提物中总黄酮、总三萜、总多酚的含量测定;水提物总多糖的含量测定;InoscavinA与Hypholomine的含量测定。以产量、功效作用及主要成分含量为指标,优选桑黄栽培种质;人工栽培流程的建立及关键环节的条件优化;桑黄采收期优化;药用饮片产地初加工的条件优化。结论:桑黄水煎液的体内抗炎及肿瘤免疫作用不明显,但经溶剂提取纯化后的桑黄不同提取部位,呈现一定的体外A549细胞株的抑制增殖作用。桑黄的抗炎及肿瘤免疫作用需进一步进行成分分离、纯化,进行不同部位的系统药效作用研究,以便进行系统性的筛选。建立的人工栽培的桑黄成分质量控制体系,对人工栽培的推广应用是切实可行的。
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