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背景:口腔溃疡是常见的口腔粘膜溃疡类疾病,其患病率高达20%左右,居口腔粘膜病的首位,在口腔疾病中仅次于龋病和牙周病,位居第三。世界卫生组织制定的口腔健康标准是:牙齿清洁;无龋齿;无疼痛感;牙龈颜色正常;无出血现象。有调查显示,目前国内口腔疾病的发病率占中国人口的74%,常见病有四种:龋病、牙周病、牙龈炎、溃疡。口腔溃疡的病因复杂,存在明显的个体差异。研究报道的发病因素甚多,但尚未统一,可能是多种因素综合作用的结果。目前口腔溃疡的治疗多通过局部治疗结合全身治疗延长间歇期,缩短发作期,缓解病情。而在各种治疗方法中,激光作为近四十年来发展起来的一种新型光源,具有普通光源无可比拟的特点:如亮度高、单色性、方向性和相干性好等。从1960年第一台红宝石激光问世以来,激光已经被广泛应用于医学的各个领域。在口腔医学使用的各类型激光中,Nd:YAG激光的应用最为广泛。它柔软的光纤作用于溃疡组织表面,可促使局部血液循环加速,改善血粘度,清除局部堆积的炎症细胞,使细胞代谢增强,各种酶的功能活跃,加速上皮细胞和成纤维细胞的增殖,加速胶原纤维增生,其结果加速溃疡愈合,缩短疗程。其次Nd:YAG激光照射组织表面时,产生瞬间的热效应,使病损表面的坏死组织瞬间产生汽化、凝固,达到消炎的目的,同时破坏了病损区的神经末梢,达到止痛作用。且Nd:YAG激光照射能干扰神经细胞细胞膜钠/钾泵的转运功能,影响其细胞膜的渗透性,抑制局部神经冲动的传导,从而取得良好的麻醉效果,使治疗后反应较轻,疼痛明显缓解,患者乐于接受。然而脉冲Nd:YAG激光在治疗口腔溃疡方面尚缺乏深入、系统的研究。目的:本研究通过建立口腔粘膜溃疡动物模型,比较4种不同剂量脉冲Nd:YAG激光照射口腔溃疡,选出有效的适宜剂量,为脉冲Nd:YAG激光治疗口腔溃疡提供理论依据。比较4种不同剂量参数脉冲Nd:YAG激光用于口腔溃疡治疗的有效性和安全性,并获得激光对口腔溃疡组织作用的有效方式、激光的最适剂量参数,探讨脉冲Nd:YAG激光在临床应用的适用性和可靠性,为该激光在口腔溃疡治疗中的应用提供理论和实验依据。材料和方法:1、体重180～220 g雄性、健康的Sprague-DaWley大鼠58只,随机抽取4只正常饲养不予任何处理作为正常对照组。其余54只大鼠进行口腔溃疡模型的建立,72 h后随机取4只建模大鼠和4只正常大鼠处死,取粘膜组织进行病理学观察判断建模是否成功。将建模成功的50只SD大鼠随机分为5组,每组10只。分别是溃疡对照组,激光含量1.5 W 40 mJ组,1.5 W 60 mJ组,1.5 W 80 mJ组,1.5 W 100 mJ组。溃疡组自然愈合,激光含量4组分别给予激光照射每日一次,连续3 d。末次治疗24 h后每组处死2只大鼠,取口腔溃疡组织进行组织病理学切片,其余各组大鼠进行溃疡愈合时间的观察,持续8 d。2、建立口腔溃疡动物模型后,将建模成功的SD大鼠进行分组,激光组做激光治疗,连续3 d。末次治疗24 h处死全部大鼠,对比各组大鼠的口腔溃疡组织中SOD、MDA、NO及NOS的活性,验证脉冲Nd:YAG激光在SD大鼠口腔溃疡治疗中的作用。3、建立口腔溃疡动物模型,取24只随机分为:口腔溃疡组、药物治疗组、激光治疗组,口腔溃疡动物建模成功后另取8只大鼠作为正常对照组。溃疡组不做处理,药物组给予1 %碘甘油局部涂布溃疡面,每日一次,连续3 d。激光组给予1.5 W 80 mJ激光照射每日一次,连续3 d。末次治疗24 h后,处死大鼠,检测组织中EGF、EGFR含量,各组间进行比较。结果:1、溃疡组平均愈合天数为(7.63±0.53),1.5 W 40 mJ组为(5.13±0.83),1.5 W 60 mJ组为(4.88±0.64),1.5 W 80 mJ组为(4.75±0.71),1.5 W 100 mJ组为(5.50±1.20)。溃疡组与激光各组比较差异显著(P < 0.05),而激光各组之间无显著性差异。本试验结果表明1.5 W 40 mJ、60 mJ、80 mJ、100 mJ激光组明显比溃疡组愈合期提前,而1.5 W 60 mJ ~ 80 mJ激光组的愈合天数为最短。2、在脉冲Nd:YAG激光治疗口腔溃疡动物体内实验中,激光照射剂量为1.5 W 60 ~ 80 mJ激光照射可以使组织中NO含量、NOS的活性降低,减少机体的炎症反应与组织细胞的损伤,且使SOD活性、MDA含量接近正常水平,机体内的氧自由基的产生和消除达到平衡。3、EGF在正常口腔粘膜中主要分布于基底层细胞和棘层细胞中,阳性表达出现在胞浆中,口腔溃疡时组织中的EGF表达量明显减少(p < 0.05)。EGFR在正常粘膜和口腔溃疡时均有表达,在正常粘膜中EGFR阳性表达主要定位于基底层细胞的胞浆和胞膜上,在口腔溃疡组织中溃疡区域阳性表达较少( P < 0. 05 ),溃疡边缘部位上皮表达也较少( P < 0.05 )。1.5 W 80 mJ激光组、药物组比溃疡组的EGF、EGFR的蛋白含量显著增高( P < 0.05 ),而与正常对照组无显著性差异。结论:1、试验结果表明1.5 W 40 mJ、60 mJ、80 mJ、100 mJ激光组明显比溃疡组愈合期提前,1.5 W 60 mJ~ 80 mJ激光组的愈合天数为最短。本研究结果证实了一定剂量范围内激光照射辅助治疗口腔溃疡能达到较好的治疗效果。2、动物体内实验表明激光剂量为1.5 W 60 mJ~ 80 mJ照射大鼠口腔溃疡面,使其组织中SOD活性、MDA含量,NO及NOS含量恢复接近至正常水平。综合实验各项指标初步确定该激光照射口腔溃疡作用的有效、安全剂量为1.5 W 80 mJ。3、口腔溃疡时,上皮细胞的增殖活动明显受到抑制,EGF和EGFR蛋白含量明显降低,二者之间存在协同效应,使口腔粘膜上皮细胞的增殖活动受到抑制。而1.5 W 80 mJ剂量激光照射和局部药物治疗,能促进溃疡的愈合。