中药根除幽门螺旋杆菌的研究(体外耐药反应实验)

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目的:本研究选用公认抗HP效果较好的黄芪、苦参、蒲公英、黄连、生甘草五味药作研究对象,对由不同剂量的这五种药物组成的三组优化组方抗HP活性进行了初步研究,通过耐药性诱导反应实验研究探讨其耐药性,从而为中药根除幽门螺旋杆菌提供新的理论依据,同时也拓宽中药的应用范围。材料与方法:制备培养基及培养皿的,激活并鉴定幽门螺旋杆菌,制备菌液,实验分组分为实验组(中药诱导组、甲硝唑诱导组、克拉霉素诱导组),空白对照组、溶剂对照组。采用多步诱导法进行HP的体外耐药试验,另选临床耐药率很高的甲硝唑和目前抗HP疗效好的克拉霉素作同步试验;观察在药物浓度逐渐增加的培养基上转种的HP最低抑菌浓度(MIC)的变化;将诱导出的耐药菌株连续转种10次后测定MIC,以判断耐药是否稳定;将敏感性下降的诱导株在无药培养基上转种3次后检测M1C值,测定三组优化组方对甲硝唑敏感性下降诱导株的M1C值。结果:1.在多步诱导培养过程中,未诱导出对精简一方、精简二方及精简三方耐药的HP菌株,而在含64倍MIC甲硝唑的培养基上菌株仍能生长,在2倍MIC克拉霉素的培养基上菌株仍能生长。2.在培养过程中,菌株对甲硝唑的敏感性逐渐下降,M1C值逐渐升高至32ug/mL;甲硝唑耐药株(MR)在无药培养基上转种10次后得到的MR’的MIC值不变;菌株对克拉霉素的敏感性也逐渐下降,M1C值逐渐升高至4ug/mL;克拉霉素耐药株(CR)在无药培养基上转种10次后得到的CR’的MIC值不变。3.精简一方、精简二方及精简三方对MR和CR的MIC值均与其相应的原始菌株相同。结论:1.本研究发现HP对三组优化组方不易产生耐药反应,HP对甲硝唑和克拉霉素容易产生耐药反应。2.HP对甲硝唑和克拉霉素产生的耐药性相对稳定3.甲硝唑及克拉霉素耐药株对三组优化组方仍保持敏感性。
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