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非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)的日渐流行给人类的健康造成了巨大威胁。随着相关研究的增多,对人类及哺乳类模式动物NAFLD形成机制的认识已取得较大的进展。研究表明哺乳动物肝细胞内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)对胰岛素抵抗(Insulin resistance, IR)的形成十分重要,而IR可诱发高胰岛素血症,将促进肝脏中的脂肪合成。相对于哺乳动物,作为重要禽产品的鹅肥肝,有关其形成机制的研究和认识还相当匮乏。鹅与哺乳类动物在进化树上存在较大的遗传距离,在营养代谢特别是脂肪代谢方面有些不同的特点。因此,作为哺乳动物NAFLD重要形成机制的ERS和IR是否同样适用于鹅肥肝还不清楚。本试验围绕这一关键问题在细胞与活体两个层面上展开研究：鹅原代肝细胞在高能营养因子(高葡萄糖和高饱和脂肪酸)刺激后,检测ERS标记基因(如Grp78和Xbp1)在这些细胞中的mRNA水平；采用药物和强制饲喂两种方式处理鹅一定时间后,对试验鹅进行血糖、葡萄糖耐受试验、胰岛素耐受试验、剖检以及基因表达分析。主要研究结果如下：1、高能营养因子的刺激可诱导鹅原代肝细胞产生ERS。本研究利用高能营养因子(高葡萄糖和高饱和脂肪酸)处理鹅原代肝细胞,并在此基础上添加不饱和脂肪酸(如油酸、亚油酸),荧光定量PCR检测ERS标记基因-Grp78和Xbp1的mRNA水平。结果显示高葡萄糖和高棕榈酸处理鹅原代肝细胞后,Grp78和Xbp1的mRNA水平都有不同程度的上调,表明高能营养因子能诱导鹅原代肝细胞产生ERS；油酸和亚油酸处理细胞后,棕榈酸所诱导的Grp78和Xbp1的mRNA表达增加受到明显抑制(P<0.05)。以上结果说明,高能营养因子可引起鹅原代肝细胞产生ERS,而不饱和脂肪酸可抑制这种诱导。2、药物诱导产生的ERS可引起鹅全身性IR和脂肪肝的形成。本试验选用两种内质网应激诱导剂即衣霉素和毒胡萝卜素(主要作用于肝脏),处理扬州鹅20 d,并对试验鹅进行血糖、葡萄糖耐受试验、剖检分析以及检测Grp78和Xbp1在肝脏中的]mRNA水平。结果显示相对于对照组,Grp78和Xbp1在衣霉素肝脏中的mRNA表达水平极显著上调(P<0.01)；20天衣霉素饲喂也引起鹅对葡萄糖耐受能力明显下降,且鹅肝也从深红色转变为脂肪肝的土黄色,这表明ERS可引起鹅产生IR,并促进脂肪肝的形成；毒胡萝卜素注射试验的结果进一步证实衣霉素试验的结论。3、填肥可引起鹅IR和脂肪肝形成,但并不通过ERS的途径。对70日龄朗德鹅进行正常或强制饲喂,在77和84日龄对禁食的试验鹅进行GTT试验,并在85日龄时测定了未禁食试验鹅的血糖水平,在88日龄禁食的试验鹅进行ITT试验以及在强制饲喂一段时间后,屠宰部分试验鹅取肝样用于检测ERS标记基因的mRNA水平。结果表明相对于正常饲养的对照组,填肥没有诱导ERS,可能与脂肪酸去饱和酶的上调有关。不过,填肥鹅在强制饲喂7天后就开始出现葡萄糖耐受能力下降的现象。在14天时,这种现象更加明显。在填肥15天时,非禁食状态下填肥鹅的基础血糖值也极显著高于对照组(P<0.01)。在18天时,ITT试验结果进一步说明填肥鹅在脂肪肝形成过程中出现了胰岛素抵抗。这种IR现象和填肥鹅肝脏呈现严重的土黄色脂肪肝密切关联。综上所述,内质网应激可引起鹅IR和脂肪肝,但强制填饲所引起的鹅IR和脂肪肝并不依赖于ERS途径。鹅胰岛素抵抗与脂肪肝的形成密不可分,胰岛素抵抗是脂肪肝形成的重要机制。