微小RNA-24/93/378在肿瘤中的表达及临床研究

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目的:  研究髓系肿瘤急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者中微小RNA-93(microRNA-93,miR-93)的表达状况,及微小RNA-93和微小RNA-378(microRNA-378,miR-378)在急性髓系白血病中的相关性。研究乳腺癌患者的福尔马林固定石蜡包埋组织(FFPE)中微小RNA-24(microRNA-24,miR-24)和微小RNA-378(microRNA-378,miR-378)的表达状况及两者间的相关性,并探索它们在乳腺癌诊断中潜在的预测价值。  方法:  应用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)技术检测miR-93、miR-24、miR-378基因的表达水平。使用SPSS16.0软件进行数据的统计分析。  结果:  1.miR-93在急性髓系白血病中的研究结果:(1)84例AML患者中有14例(16.7%)过表达miR-93。miR-93高表达组的白细胞计数明显低于低表达组(P=0.003),两组的其他参数如年龄、性别、血红蛋白以及血小板等没有统计学意义。AML组中每个亚型都存在miR-93高表达病例,但各型之间的差异无统计学意义。相比较于其他核型分组,中等预后组中,miR-93高表达的频率相对更低[4/46(8.7%)与10/38(26.3%),P=0.041]。(2)在miR-93高表达组和低表达组,完全缓解率差异无统计学意义(64%与43%,x2=2.064,P=0.231)。两组的总体生存率的差异也无统计学意义[46%(6/13)与43%(28/65),x2=0.292,P=0.589]。对完全缓解的急性髓系白血病患者进行统计分析得出,miR-93高表达组和低表达组无复发生存率的差异也无统计学意义[75%(6/8)与84%(27/32),x2=0.341,P=0.559]。随后,我们用Spearman相关系数分析得出miR-93与miR-378之间存在正相关性(r=0.321,P<0.01)。  2.miR-24和miR-378在乳腺癌患者的福尔马林固定石蜡包埋组织(FFPE)中表达的相关性及临床研究:(1)乳腺癌患者FFPE组织中miR24/378的表达和相关性:与对照组相比,乳腺癌患者miR-24和miR-378都呈现出高表达(P<0.01)。乳腺癌患者和对照组miR-24水平的中位数分别是3.262和0.275。乳腺癌患者和对照组miR-378水平的中位数分别是1.002和0.096。此外根据散点图,Spearman相关分析反映两种miRNA之间存在着高相关性,其相关系数r=0.778。(2)可作为诊断乳腺癌的一组有高度特异性和敏感性的miRNA:利用ROC分析评估了miRNA对101位患者和40位对照组之间进行区分的能力,并对最佳临界值进行了测定。在鉴别乳腺癌患者与对照组时miR-24显示出0.79的AUC,62.5%的灵敏度和90%特异性;同时miR-378显示出0.807的AUC,68%的灵敏度和85%特异性。研究结果表明,选定的miRNA将有望作为乳腺癌的生物标记物。两个miRNA合同AUC为0.711,这与单个miRNA相比并没有显著的差异。一元逻辑回归分析也发现miR-24和miR-378水平与乳腺癌有显著关联(P<0.01)。然而,同时包含两种miRNA的多元回归分析显示,两个miRNA合同与乳腺癌的关联性却大大减弱。(3)miR-24和miR-378表达与乳腺癌临床病理特征的相关性:为了进一步评估miR-24和miR-378高表达与乳腺癌临床过程是否有关,我们分析了两个miRNA与乳腺癌患者临床病理状态的关联性。miR-24/378高表达与大部分乳腺癌患者的临床病理特征并不相关。  结论:  (1)miR-93在AML中表达率明显增加,且与miR-378表达率呈正相关。miR-93联合miR-378的表达可能作为AML诊断的参考依据;  (2)乳腺癌患者FFPE组织中过表达miR-24和miR-378可作为发现和验证乳腺癌的一种理想的生物标志物资源。
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