目前临床上用于治疗血栓性疾病的方法主要是溶栓疗法,但如今的溶栓药物都存在一定的缺陷,因此开发高效价廉、安全、能溶解陈旧性血栓的纤溶酶尤为重要。本文对海洋枯草芽孢杆菌FA-7进行紫外诱变,经平板初筛、复筛和摇瓶复筛获得一株遗传稳定性良好的高产纤溶酶菌株Y-22,其酶活稳定在465±9.7 IU/mL,是出发菌株的1.56倍。对菌株Y-22进行发酵条件研究,确定其最佳发酵条件为:可溶性淀粉4%,黄豆粕粉 2.5%,KH2PO40.1%,K2HPO40.3%,CaCl2 0.025%,MgSO4·7H2O0.35%,吐温80 0.15%,菌种种龄18h,接种量4%,装液量 50mL/250mL,初始 pH 为 5.5,30℃,180r/min 振荡培养 96h。在此条件下,发酵液酶活稳定在926±14.97IU/mL,是未优化前的1.99倍。对纤溶酶的两种沉淀方法的沉淀效果进行研究,发现发酵粗酶液经过硫酸铵沉淀后纤溶酶酶活回收率为84.67%,纯化倍数为1.73倍;经乙醇沉淀后纤溶酶的酶活回收率为87.98%,纯化倍数为1.88倍。酶的溶栓性能研究发现该纤溶酶不是激酶,它直接作用于纤维蛋白;在作用时间为32h时,其溶解新鲜血栓的溶栓率为81.02%;作用时间小于48 h时,其溶解血栓的效果随着时间的延长而显著提高,说明该酶有较长的药效持续时间;对该纤溶酶溶解陈旧性血栓的研究发现,对于形成1个月的血栓,纤溶酶的溶栓率是新鲜血栓的90.92%,对于形成2个月的血栓,其溶栓率是新鲜血栓的86.94%,而尿激酶基本不能溶解陈旧性血栓;该纤溶酶在有胃蛋白酶存在条件下酶活损失严重,在肠道环境中具有一定的稳定性;同时发现该纤溶酶具有较好的抗凝效果,且对血细胞基本没有破坏作用。