本项目研究了黑鳗藤新苷K对二硝基氟苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)、大鼠同种异体皮肤移植排斥反应以及小鼠OVA特异性免疫反应的体内免疫抑制活性。实验结果显示黑鳗藤新苷K可显著降低耳廓肿胀度，抑制小鼠的迟发型超敏反应，并与CsA作用相当；大鼠同种异体皮肤移植排斥反应显示，黑鳗藤新苷K能明显延长移植皮片的存活时间，减少皮肤移植排斥反应；黑鳗藤新苷K还能显著地抑制ConA、LPS诱导的OVA免疫小鼠T、B淋巴细胞增殖和OVA诱导的特异性淋巴细胞增殖，能使OVA免疫小鼠血清中的OVA特异性IgG抗体效价显著降低。进一步研究发现，黑鳗藤新苷K可显著抑制小鼠血清中OVA特异性抗体亚类IgG1和IgG2b的抗体效价水平；抑制OVA诱导的特异性Th1细胞因子(IL-2、IFN-γ)和Th2细胞因子(IL-4)的分泌。由此可以推测，黑鳗藤新苷K可通过抑制Th1、Th2细胞免疫反应而抑制机体的抗原特异性细胞免疫和体液免疫应答，从而有效缓解同种异体移植排斥反应和抑制迟发型超敏反应。 为了进一步探讨该类C21甾体苷的作用机制，本项目选取了体外作用最为显著，化学结构与黑鳗藤新苷K相似的黑鳗藤新苷L，用流式细胞术测定了其对小鼠脾淋巴细胞T细胞亚群CD4+、CD8+细胞的影响，用ELISA法测定了分泌的Th1/Th2细胞因子(IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ)含量，并用RT-PCR方法分析了Th1/Th2细胞因子及转录因子GATA-3、T-bet的基因表达水平。实验结果显示，黑鳗藤新苷L可明显减少ConA诱导的CD4+T细胞的增殖，降低CD4+/CD8+T细胞的比例至正常水平；能使小鼠脾淋巴细胞的培养上清液中Th1/Th2细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-10和IL-4的量呈浓度依赖性地降低。黑鳗藤新苷L还能浓度依赖性地显著抑制ConA诱导的Th1/Th2细胞因子和调控转录因子(T-bet、GATA-3)mRNA的高表达。由此表明，黑鳗藤新苷L能通过调控转录因子T-bet和GATA-3的mRNA表达而影响Th1和Th2细胞因子的mRNA表达，抑制Th1和Th2细胞因子的分泌，抑制Th1和Th2细胞的免疫应答，选择性地降低CD4+T细胞的比例，从而抑制机体的细胞免疫和体液免疫反应。 本研究为黑鳗藤民间用于治疗类风湿性关节炎和关节疼痛提供了理论依据，也为该系列C21甾体苷类化合物作为新型免疫抑制药物的筛选和开发提供了研究基础。