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为建立一种敏感、特异、快速诊断结核病的方法，本研究以PCR联用探针方法作为对照，对两种类型，两利酶标的DNA探针直接杂交检测结核杆菌的方法与条件及其临床应用做了较系统的研究。 制备、标记两种对结核分枝杆菌复合体特异的DNA探针：5′端标记生物素的寡核苷酸TB-42探钊和PCR合成生物素标记的188bp DNA探针。通过生物素、链霉亲和素系统连接碱性磷酸酶(催化显色反应)或辣根过氧化物酶(催化化学发光反应)枪测探针信号。首次应用188bp DNA探针杂交检测结核分枝杆菌(M.TB)染色体DNA和PCR扩增的317bp片段。系统研究并优化两种探针杂交检测的条件；比较两种探针杂交以化学发光法与显色法检测的敏感性与特异性；采用斑点杂交方法对20株结核分枝杆菌临床分离株，110份采用常规方法处理的痰标本以及68份采用自己建立的简化方法处理的痰标本进行检测、鉴定，验证两种探针临床应用的可行性。 研究发现，点膜条件：杂交与洗膜温度、杂交时间以及杂交液、洗膜液成份、探针浓度等均对杂交检测结果有影响。两种探针分别对21种分枝杆菌与9种非分枝杆菌的染色体DNA、317bp片段进行杂交反应。结果表明，特异性都很强，两者均仅对结核分枝杆菌复合体呈阳性反应，其它受试菌均呈阴性反应。当用显色反应检测时，寡核苷酸探针TB42检测结核分枝杆菌染色体DNA的敏感性为110ng，检测317bp DNA片段的敏感性为200pg；188bp DNA探针杂交检测的敏感性分别为7ng和50pg，结果表