落叶松是重要的造林和经济树种,在经济和生态方面起着至关重要的作用。目前常规育种手段由于成本高和周期长等特点,使得落叶松生产量无法满足社会需求量。随着生态平衡的破坏,在日益恶劣的生存环境下,提高落叶松的抗逆性显得尤其重要和迫切。因此,基因工程育种在林木育种中的地位愈发重要。基于实验室前期研究,LoERF017基因已在拟南芥中进行了功能验证,通过实验得出,该基因在拟南芥中具有抗旱性,转基因拟南芥株系抗旱性明显高于野生型拟南芥。本研究在高效的体细胞胚诱导体系的基础上,采用农杆菌介导法对日本落叶松进行遗传转化,获得了转基因植株。并对其进行抗逆性分析。主要获得以下研究成果:(1)对该基因进行亚细胞定位,结果显示LoERF017基因定位于细胞核中。荧光定量PCR结果表明,该基因在根中的表达量最高,在茎中的表达量最低,在叶中的表达量居中。干旱胁迫下,LoERF017基因的表达量在根中呈上升趋势,复水后,该基因的表达量有下降趋势。(2)转基因落叶松再生植株的获得。以日本落叶松胚性愈伤组织为受体材料,通过农杆菌介导法在日本落叶松中进行LoERF017基因的遗传转化,共获得3个抗性愈伤,对转基因株系进行DNA水平和RT-PCR检测,发现均为阳性。从而确定获得了转基因植株。(3)转基因落叶松抗旱性分析。分别对三个LoERF017基因过表达的转基因落叶松株系,和野生型植株进行7%PEG6000胁迫。通过观察发现,转基因植株比野生型相比,受到的损伤较轻;通过组织化学染色分析,以及MDA含量、脯氨酸含量、可溶性蛋白含量、叶绿素含量、相对电导率生理指标以及愈伤组织增殖量的测定发现,在干旱胁迫处理条件下,转基因落叶松株系与野生型落叶松植株受到的伤害相比,程度较低。表明LoERF017基因在落叶松中过表达提高了转基因落叶松植株抗逆性。