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研究背景骨肉瘤(osteosarcoma OS)是一种高度恶性的原发性骨肿瘤,它的死亡率和致残率都非常高,目前名列所有恶性骨肿瘤之首。随着对肿瘤发生、发展认识的不断深入和外科技术的发展,OS的5年生存率由低于20%升高到50%~60%,并且90%以上的肢体OS患者可行保肢治疗;然而,超过50%的患者仍可能出现肺转移,是患者死亡的最主要原因。对于发生肺转移和局部复发的OS患者,预后极差,尚无有效方法,成为如今限制OS患者生存率进一步提高的“瓶颈”问题。探索新的治疗手段,寻找更为有效的治疗模式一直是学术界不懈的追求,亦是社会发展的迫切需要。现今,对OS的发病机制仍不明确,但随着肿瘤免疫学的不断发展,T细胞免疫功能对OS的发病影响越来越得到重视。CD4+IL-17+Th17来源于CD4+T细胞,其功能相互拮抗,维持机体微环境的稳定;而过多表达的炎症因子,破坏了Treg与Th17细胞的平衡,导致肿瘤的发生、发展。由于Th17与Treg在肿瘤的发展、转移中起到关键的作用,因而探讨它们之间与OS的关系,则是为OS的治疗提供新的方向和依据。目的通过检测OS患者外周血CD4+IL-17+Th17细胞和CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞、IL-17水平以及碱性磷酸酶(ALP),明确OS患者外周血Th17、Treg细胞的变化情况,初步探讨Th17、Treg细胞的改变对OS发病、发展的影响,为揭示OS发病的分子机制提供理论和实验依据。方法以OS患者和对照组为研究对象,采用流式细胞技术(Flow Cytometry,FCM)检测各组外周血CD4+IL-17+Th17细胞和CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的表达率和使用酶联免疫吸附测定技术(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组血清IL-17的水平,同时观察OS患者入院常规抽血检查中的ALP水平。所得数据经过SPSS 18.0统计软件进行数据统计分析,计量资料用均数±标准差(`x±s)表示,两组间比较釆用两样本独立t检验,以P<0.05为差异具有统计学意义。结果OS患者外周Treg细胞表达率较对照组明显升高,OS组、对照组的表达率分别为:10.252±1.294%和5.859±1.439%(P<0.05);OS患者外周Th17细胞表达率较对照组显著升高,OS、对照组的表达率分别为:4.017±0.540%和2.163±0.600%(P<0.05);OS患者中的Th17细胞和Treg细胞表达率均与ALP呈正相关,其r值分别为0.892和0.805;进一步分析两组Th17/Treg比率,OS组的Th17/Treg比率较对照组的高,但两者对比无明显统计学意义,OS组和对照组分别为:0.394±0.047和0.375±0.077(P>0.05)。此外,所有血清标本中IL-17的水平较低,仅有少量(n=2)测出,余均低于本实验ELISA检测最低阈值。结论OS患者外周血中的Treg细胞和Th17细胞数量比例较对照组明显升高,且OS组中两种T细胞均与ALP呈相关,这提示诱导OS发生、发展的原因可能与Th17细胞和Treg细胞比例的改变引起机体的免疫抑制有关;Th17/Treg有轻度变化,但无统计学差异,考虑与本实验样本数少相关;血清IL-17水平极低,低于现有ELISA试剂盒检测最低阈值,这可能测试方法敏感度不高有关,需要寻找灵敏度更高的方法用于研究血清IL-17的含量。