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目的:本研究主要是探讨uPA抑制剂阿米洛利对慢性髓系白血病K562细胞株及K562/ADM细胞株凋亡的影响,进一步探讨阿米洛利诱导白血病细胞凋亡的相关机制。材料与方法:不同浓度的阿米洛利作用于K562细胞和K562/ADM细胞24h、48h、72h后,应用流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡变化;采用qRT-PCR技术检测相关基因uPA、uPAR、AKT mRNA表达变化;利用Western blot技术检测AKT、p-AKTser473、p-AKTthr308蛋白表达变化。结果:1.流式细胞术结果显示0.01mmol/L、0.1mmol/L、1mmol/L的阿米洛利作用K562细胞及K562/ADM细胞24h、48h、72h可诱导K562细胞和K562/ADM细胞发生凋亡,随时间和浓度的增加而增加,具有一定的时间和剂量依赖性。与对照组相比,1mmol/L阿米洛利作用K562细胞和K562/ADM细胞72h后,诱导凋亡作用最为显著（P<0.001）,0.01mmol/L阿米洛利作用K562细胞和K562/ADM 24h、48h后,与对照组相比无明显差异（P>0.05）。2.实时荧光定量PCR结果显示0.01mmol/L、0.1mmol/L、1mmol/L的阿米洛利分别作用K562细胞及K562/ADM细胞24h、48h、72h后,可下调K562细胞和K562/ADM细胞uPA、uPAR mRNA表达水平,72h作用结果最为显著。对K562细胞,0.01mmol/L阿米洛利作用细胞72h后,uPA、uPAR mRNA相对表达量与对照组相比下降显著（P<0.05）;0.1mmol/L和1mmol/L阿米洛利作用细胞72h后,uPA、uPAR mRNA相对表达量下降极显著（P<0.01）。对K562/ADM细胞,0.01mmol/L阿米洛利作用细胞72h后,uPA mRNA相对表达量与对照组相比下降显著（P<0.05）,uPAR m RNA相对表达量变化无统计学差异（P>0.05）;0.1mmol/L和1mmol/L阿米洛利作用细胞72h后,uPA mRNA相对表达量下降极显著（P<0.01）,uPAR mRNA相对表达量下降明显（P<0.05）。阿米洛利抑制uPA和uPAR mRNA表达具有一定时间和剂量依赖性,而AKT没有明显变化（P>0.05）。3.Western blot检测结果显示,0.01mmol/L、0.1mmol/L、1mmol/L的阿米洛利处理K562细胞及K562/ADM细胞72h后,p-AKTser473和p-AKTthr308蛋白表达随浓度的增加逐渐下降。1mmol/L阿米洛利处理细胞72h后,K562细胞及K562/ADM细胞p-AKTser473和p-AKTthr308蛋白表达水平下降显著（P<0.05）。结论:阿米洛利具有诱导K562细胞及K562/ADM细胞凋亡的作用,其诱导凋亡的作用可能与降低uPA、uPARmRNA表达水平,下调PI3K/AKT信号通路中磷酸化AKT蛋白活性有关。