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研究背景 帕金森病是中老年常见的神经系统变性疾病，主要病理改变是黑质多巴胺(dopamine，DA)能神经元的变性缺失，目前尚无有效的治疗方法。细胞移植治疗是比较有前景的治疗手段。骨髓间质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells，MSCs)具有多向分化潜能，易于获得，可自体移植无免疫排斥等特性，被认为在帕金森病的细胞移植治疗方面具有一定的应用潜力，但如何诱导其向DA能神经元表型分化是这一治疗手段所面临的关键技术问题之一。孤儿核受体Nurr1 (nuclear related regulator-1，Nurr1)是类固醇／甲状腺激素核受体超家族成员的转录因子，Nurr1能调节多巴胺能神经元的发育并维持其表型。Nurr1基因修饰是否具有促进MSCs向DA能神经元分化的作用报道较少。 目的：探讨Nurr1基因修饰结合三七总皂甙(tPNS)和维甲酸(RA)的联合诱导对MSCs向DA能神经元分化的影响。 方法：构建pcDNA3.1-hygro-Nurr1表达质粒，应用脂质体Lipofectamine2000转染MSCs，利用细胞免疫化学方法检测Nurr1基因的表达。对可表达Nurr1的MSCs，添加tPNS／RA诱导其向神经元样细胞分化，免疫组化法检测分化细胞的酪氨酸羟化酶(TH)、乙酰胆碱酯酶(AchE)和γ-氨基丁酸(GABA)表达，并与tPNS／RA组、Nurr1组和对照组比较，观察Nurr1基因修饰结合tPNS／RA的联合诱导对MSCs向神经元样细胞分化的影响。 结果：转染的Nurr1基因在MSCs中表达。Nurr1基因修饰联合tPNS／RA诱导可促进MSCs向TH阳性细胞分化，Nurr1基因修饰+tPNS／RA组TH阳性细胞比例(20.4％±4.6％)明显高于tPNS／RA组(5.7％±3.6％)。Nurr1基因修饰减少tPNS／RA诱导分化的AChE阳性细胞比例，Nurr1+tPNS／RA组和tPNS／RA组的AchE阳性细胞的比例分别是41.8％±4.8％、50.4％±5.2％。Nurr1基因修饰对tPNS／RA诱导向GABA阳性细胞分化无影响，Nurr1+tPNS／RA组和tPNS／RA组GABA阳性细胞