微囊化细胞技术已被广泛应用在细胞培养、免疫隔离等方面的研究。APA 微囊以其生物相容性好的特点而得到研究人员的重视。但 APA 微囊的制作方面也存在一些问题。胚胎干细胞是解决细胞来源不足的主要方法,它在今后细胞治疗方面具有重要的意义，.但目前胚胎干细胞定向分化过程中存在拟胚体获得率低的问题。另外微囊化细胞的运输冻存也是急需解决的问题。因此本文从以下三个部分对这也问题进行了研究第一部分 APA 微囊的制备及检测. 目的：优化高压脉冲静电液滴发生器制备微囊的条件。方法：利用本实验室设计制作的高压脉冲静电液滴发生器制作微囊,测定了微囊的直径分布,比较了聚赖氨酸（PLL）处理不同时间及柠檬酸钠液化与否对微囊稳定性的影响。在此基础上检测了微囊的组织相容性和细胞生物相容性。结果：高压脉冲静电液滴发生器制作的胶珠直径范围为100-750μm;APA微囊具有长期稳定性,聚赖氨酸处理6min,并且不用柠檬酸钠处理其稳定性最好,体外 150 天后微囊的正常率为 73.0%。移植入体内 5 周后,回收率达 80％。细胞在微囊内可以正常生长。结论：应用高压脉冲静电液滴发生器可以制作大小均匀一致,稳定性、生物相容性良好的微囊。第二部分 微囊化细胞的冻存研究. 目的 观察不同类型微囊冻存细胞的效果,为微囊冻存选择合适的冷冻保护剂。方法:1 应用本实验室制作的高压脉冲静电液滴发生器制作液化的海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)微囊和海藻酸钠-钙胶珠包被 HK-2 细胞.2用 DMSO 和甘油作为冷冻保护剂冷冻未包被的 HK-2 细胞、APA 微囊包被的 HK-2 细胞、胶珠包被的 HK-2细胞。3 解冻后用 MTT 法（四噻唑蓝）测定细胞活性、考马斯兰法测定蛋白质含量、Hochest33258 荧光染料测定 DNA 含量。结果 解冻后液化微囊内 HK-2 细胞的细胞活性、蛋白质含量、DNA 含量均显著高于胶珠内细胞（P<0.05），但与未包被组差异不显著（P>0.05）。DMSO 作为冷冻保护剂，细胞活性、蛋白质含量均高于甘油组（P<0.05），但二者在 DNA含量上无差异（P>0.05）。液化微囊与 DMSO 合用细胞活性、蛋白质含量、DNA 含量均高于液化微囊与甘油合用（P<0.05）。液化微囊解冻后稳定性优于胶珠。结论 液化微囊冷冻保存效果优于胶珠，DMSO 适于微囊冷冻。第三部分 微囊化胚胎干细胞的培养 目的：观察胚胎干细胞在微囊中分化形成拟胚体的可行性．方法：应用自制的高压脉冲静电液滴发生器制作的直径为 １００－７５０μｍ 的 ＡＰＡ 微囊包被绿色荧光蛋白标记的小鼠胚胎干细胞，观察微囊中胚胎干细胞方法分化为拟胚体，释放拟胚体，贴壁培养，观察拟陪体的分化，。结果　单个胚胎干细胞在微囊中可以形成拟胚体，形成率为 ４０±６．００。拟胚体具有正常的分化能力。结论　应用微囊化技术可以大规模扩增拟胚体，为组织工程提供种子细胞。